[发明专利]一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法

权利要求书

1.一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：将丹参毛状根接种到改良的6,7-V培养基中继代培养后，向其内加入NEM进行旁路抑制处理；处理完毕后继续培养即可，所述的旁路抑制处理中，0＜NEM添加浓度≤5mg/L，处理时长为4-240h，且处理效果随着处理时长的递增，促进效果越好，

改良的6,7-V培养基由大量溶液、微量溶液、铁盐、氯化钙、盐酸、肌酸、盐酸硫胺、吡多素和蔗糖构成，每升中的配方构成为：

大量溶液 10 mL，

微量溶液 10 mL，

铁盐溶液 10 mL，

氯化钙 2.2 mL，

盐酸 1 mL，

肌醇 2 mL，

盐酸硫胺 1 mL，

吡多素 1 mL，

蔗糖 30 g；

所述的大量溶液，其每升的配方构成为：

硫酸铵 10 g，

硫酸镁 12 g，

氯化钾 20 g，

磷酸氢二钠 2 g，

硝酸钾 80 g，

二水合磷酸二氢钠 16.95 g；

所述的微量溶液，其每升的配方构成为：

氯化钾 0.005 g，

硼酸 0.5 g，

二水合硫酸锰 0.341 g，

二水合锰酸钠 0.025 g，

五水合硫酸铜 0.025 g，

六水合氯化钴 0.025 g

四水合硫酸锌 0.228 g；

所述的铁盐溶液中，

七水合硫酸铁 0.556 g，

二乙胺四乙酸二钠 0.746 g。

2.根据权利要求1所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述的NEM添加浓度为0.5mg/L或2.5mg/L。

3.根据权利要求1所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述的处理时长为24-144h。

4.根据权利要求1所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述的继代培养在恒温摇床上进行，培养温度为20-28℃，转速90-150rpm，暗培养。

5.根据权利要求1所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述的继代培养时间为9-25天，继代培养结束时，向其内添加NEM进行旁路抑制处理。

6.根据权利要求1所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述NEM处理后培养所得毛状根有效物质的检测方法为：取样→清洗→冷冻干燥→磨碎，甲醇提取→超声处理→离心，取上清液，进行检测起有效成分，其中，所述的磨碎至可过0.45mm筛孔，提取用甲醇体积浓度为70%，超声处理过程中采用间断颠倒混合处理。

7.根据权利要求1-6任一项所述的一种促进丹参毛状根迷迭香酸积累的方法，其特征在于：所述改良的6,7-V培养基的pH为5.8。