[发明专利]LIPUS对三维支架材料上MC3T3‑E1细胞内RNA表达影响的研究方法在审
| 申请号： | 201710690605.1 | 申请日： | 2017-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN107345255A | 公开（公告）日： | 2017-11-14 |
| 发明（设计）人： | 吴琳;刘洁;冯丽芳;曹洪娟;刘笑涵 | 申请（专利权）人： | 中国医科大学附属口腔医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 沈阳东大知识产权代理有限公司21109 | 代理人： | 赵嬛嬛 |
| 地址： | 110002 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | lipus 三维 支架 材料 mc3t3 e1 细胞内 rna 表达 影响 研究 方法 | ||
1.LIPUS对三维支架材料上MC3T3-E1细胞内RNA表达影响的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将MC3T3-E1细胞接种到三维支架材料上；
(2)将接种完毕的三维支架材料和超声探头浸入水中，保持超声探头和材料的距离为5cm，从材料底部加载LIPUS，加载参数为：超声频率1～3.3MHz，强度10～100mW/cm2，10～30min/次，1次/d，加载周期为1～21d，加载过程中每2～3天更换一次MC3T3-F1细胞的培养基；
(3)停止加载LIPUS后，收集材料上的MC3T3-E1细胞，进行全转录组和miRNA的高通量测序，筛选差异表达的mRNA、lncRNA、miRNA，并结合GO和KEGG进行整合分析。
2.根据权利要求1所述的LIPUS对三维支架材料上MC3T3-E1细胞内RNA表达影响的研究方法，其特征在于，所述将MC3T3-E1成骨细胞接种到三维支架材料上，具体接种方法为：将经过真空除气和预湿的三维支架材料放入六孔板中；将融合度达到80％的MC3T3-E1细胞用胰蛋白酶消化得到细胞悬液；将细胞悬液均匀接种到三维支架材料上，然后在六孔板中加入培养基孵育。
3.根据权利要求1或2所述的LIPUS对三维支架材料上MC3T3-E1细胞内RNA表达影响的研究方法，其特征在于，所述三维支架材料为Ti-6Al-4V多孔支架材料。
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