[发明专利]一种急性高尿酸血症小鼠模型的构建方法

说明书

技术领域

本发明属于模型构建技术领域，具体涉及一种急性高尿酸血症小鼠模型的构建方法。

背景技术

尿酸是人体嘌呤代谢的终产物，主要有肝脏代谢产生，肾脏排泄出体外。高尿酸血症（hyperuricemia，HUA）是血液中由于肝脏代谢产生尿酸过多或肾脏排泄尿酸减少，或者两者兼有的原因产生血液中尿酸水平增高，甚至高于血尿酸产生结晶的饱和浓度（>7.0mg/dl，相当于416.5μmol/L）是的病理状态。近年来，随着人民生活水平的提高，饮食结构和生活习惯的改变，高尿酸血症的患病率逐年增高，流行病学研究资料表明高尿酸血症和原发性痛风的发病呈上升趋势，在中国，已经有1.2亿的HUA人群，大约占总人口的10%，中老年及绝经后的妇女为高发人群，近年来发病年龄也呈年轻化的趋势。高尿酸血症与肥胖、高血压、高脂血症、冠状动脉粥样硬化性心脏病、胰岛素抵抗的发生密切相关，已成为识别代谢综合征的早期标志，这使人们对高尿酸血症产生了更多关注，并重新审视一些疾病的危险因素和防治策略，治疗和控制高尿酸血症已成为代谢性疾病治疗的重要组成部分。动物模型是研究疾病发病机理，寻找新型治疗药物的重要工具。目前国内外高尿酸血症动物模型复制方法多样，主要造模方法有补充尿酸前体物质次黄嘌呤、补充外源性尿酸，使用氧嗪酸钾（potassium oxonate ）抑制尿酸酶活性、腺嘌呤抑制尿酸排泄。其中应用较为成熟稳定且常用的造模方法通过氧嗪酸抑制尿酸酶活性导致血清尿酸值升高。但现有的动物模型在稳定性和代谢途径方面均存在一定的不足，因而限制了治疗高尿酸血症药物的发展及高尿酸血症致病机制研究。探索建立更合乎人类发病机制、与人体尿酸代谢异常相似的动物模型仍是目前高尿酸模型研究中值得不断探索和努力的课题。

随着人们对高尿酸血症发病机制认识的日益加深，新的治疗靶点不断被发现，新型治疗药物也相继问世。寻找更加合理、科学的药效学评价动物模型迫在眉睫。

肌苷(Inosine)，也称为次黄苷、次黄嘌呤核苷等，是由次黄嘌呤于核糖结合而成的核苷类化合物，为人体的正常成分，是腺嘌呤的前体，能直接透过细胞膜进入体细胞，参与体内核酸代谢、能量代谢和蛋白质的合成。在嘌呤的从头合成中，肌苷酸(IMP)可以作为合成腺苷酸(AMP)和鸟苷酸(GMP)的前体，Inosine是体内ATP、辅酶A、核糖核酸及脱氧核糖核酸等生命分子的基本组成，在体内转变为肌苷酸及三磷酸腺苷，并继而转换为其他多种核苷酸，同时肌苷也是尿酸合成的底物，肌苷位于尿酸代谢途径较前位置上。申请号CN201610152619.3中使用肌苷与氧嗪酸钾的用量比为1:2-3:2，可提供了一种用于构建急性高尿酸血症动物模型的组合物以及运用该组合物构建急性高尿酸血症动物模型的方法，其原理是通过增加体内尿酸前提物质和抑制体内尿酸酶两种途径来实现大小鼠的血清尿酸值增高（在这之前研究已经表明氧嗪酸钾单独用药即可导致大小鼠血清尿酸值的升高），氧嗪酸钾是尿酸酶抑制剂，其成模型的原理是通过抑制体内尿酸酶活性而造成体内血清尿酸值升高；因为人类等高等灵长类在长期的进化过程中尿酸氧化酶等相关基因发生了突变，尿酸酶失去活性，其高尿酸血症形成机理主要是嘌呤代谢紊乱所致的肝脏代谢产生尿酸过多或肾脏排泄尿酸减少引起，因此该模型形成的机理与人类高尿酸血症形成的机理有所不同。同时，该申请中不同时间点血液样品的获得是来自不同动物，其实验结果的参考性有限。

由于尿酸代谢的复杂性，同一造模剂，不同的给药途径、给药剂量及动物来源对高尿酸血症影响较大；如果剂量过大，则死亡率增高；如果剂量不足，则成模率较低。不同公司生产的试剂、药品含结晶水多少、以及药品放置时间，对剂量的选择也均有影响。所以摸索出合适的剂量选择区间，使用标准化试剂，通过药物量效关系实验摸索最佳造模剂量尤为重要。目前仍然缺乏稳定的模拟人类尿酸代谢途径的高尿酸动物模型，因此如何克服现有技术的不足是目前模型构建技术领域亟需解决的问题。

发明内容

鉴于目前对模拟人类尿酸代谢途径相似途径获得的高尿酸动物模型开发的需求，本发明利用医学生物研究中常用的实验动物ICR小鼠，提供一种急性高尿酸血症小鼠模型的构建方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种急性高尿酸血症小鼠模型的构建方法，将肌苷腹腔注射至ICR小鼠，注射量为400-500mg/kg，即获得急性高尿酸血症小鼠模型。

进一步，优选的是，所述的ICR小鼠为SPF级ICR小鼠。