[发明专利]一种基于E2蛋白检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒有效
| 申请号： | 201710698052.4 | 申请日： | 2017-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN107664694B | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 宁章勇;许古明;刘健新;郭世宁;张凯照;葛士坤 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 单香杰 |
| 地址： | 510630 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 非典型 瘟病毒 抗体 检测 流行病学调查 瘟病毒感染 发明试剂 反应结果 临床样本 酶标抗体 血清抗体 阳性血清 阴性血清 反应板 灵敏度 试剂盒 显色液 终止液 血清 包被 灵敏 兽医 监测 观察 创建 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，包括SEQ ID NO.1所示序列的猪非典型瘟病毒E2蛋白包被的反应板、酶标抗体、显色液、终止液、阳性血清和阴性血清；所述猪非典型瘟病毒E2蛋白的制备方法为：将SEQ ID NO.2所示序列的猪非典型瘟病毒E2基因克隆至原核表达载体上，将得到的重组原核表达载体转化感受态细胞，筛选阳性重组菌株，诱导阳性重组菌株获得E2蛋白。
2.根据权利要求1所述的猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述原核表达载体为PGEX-6P-1。
3.根据权利要求1所述的猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述感受态细胞为BL21大肠杆菌。
4.根据权利要求1所述的猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，使用IPTG诱导阳性重组菌株表达目的蛋白，IPTG终浓度为1.0 mmol/L、温度为37 ℃条件下诱导表达8小时。
5.根据权利要求1所述的猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述包被方法为：10 μg/mL的E2蛋白按每孔100 μL加入反应板中，4 ℃过夜包被，次日PBST洗板3次，拍干。
6.根据权利要求1所述的猪非典型瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于，所述显色液为TMB，所述终止液为浓度2 mol/L的H2SO4。
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