[发明专利]具有内参照的免疫组化载玻片及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种有内参照的免疫组化载玻片及其制备方法和应用。

背景技术

免疫组化(Immunohistochemistry，IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记于抗体的显色剂显色来确定组织细胞中是否存在目的抗原，对其进行定位、定性及定量研究的实验检测技术，其染色结果是临床病理医师做出正确诊断的重要依据，尤其在肿瘤病理诊断、鉴别诊断、肿瘤靶向治疗药物的筛选以及预后评估等方面，具有重要的意义。同时也在科研工作中提供重要的依据和极大的便捷。

由于免疫组化技术自身的特点，现有的免疫组化实验检测及结果报告存在较为严重的缺陷，主要表现在实验的客观性和结果判读的主观性缺陷两个方面。

1)实验的客观性缺陷。长期以来，针对生物样本的免疫组织化学实验操作，尚缺乏切实有效的质量控制。目前，免疫组化实验的质量控制，主要聚焦于：①免疫组化实验操作规范化培训，即选取某经过实验反复验证过的生物组织样本作为“内参照”，由实验技术人员按照标准化操作流程进行实验操作。目的是根据实验结果判断实验者的操作技术是否合格、能否胜任免疫组化实验技术工作。②设置实验组内参照片，即在同一批次的免疫组化实验片中，另外增加两张实验参照片，其中一张为阳性对照片、另外一张为阴性对照片。如此，能起到一定的免疫组化实验操作质量控制的作用。

上述免疫组化实验的客观性缺陷在于：①即使经过培训合格，不同的实验技术人员之间，具体的操作客观存在差异。即使是同一个人，在不同的时间重复做同一免疫组化实验，也存在客观的差异。②在客观上，任何两次重复做同一个实验的实验条件，难以做到完全一致。因为，尽管严格遵照同一标准化操作流程(SOP)，具体实验操作的时间、温度、甚至是同一份实验试剂经过一段时间的存放等等细微的因素，都有可能导致免疫组化实验结果的差异。③设置免疫组化实验组内阳性和阴性对照，对于免疫组化实验操作质量的控制，意义非常重大。但这样的组内参照的设置，仍然无法消除组内实验差异，更重要的是，这样的定性内参照的设置，对于由实验操作等引起的免疫组化实验染色强度量的差异的甄别，无明确的指导价值。

2)判读的主观性缺陷。①长久以来，免疫组化结果尚由临床病理医师在显微镜下主观阅片判读，不同病理医师对于免疫组化染色强度的判断尺度，现实中存在主观上的不完全的一致性；即使同一位病理医师在相隔较长的时间后就同一张免疫组化染色片进行判读，也可能会存在一定的差异。②如果是由实验系统误差导致的免疫组化染色强度有所增减，临床病理医师在阅片判读时更是无从识别。

有鉴于此，本领域亟需要一种能够校正上述客观性的操作误差、组内实验误差及主观性缺陷，并能够甄别染色强度量的差异的免疫组化产品、其制备方法以及免疫组化检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题之一在于，提供一种能够校正客观性的操作误差、组内实验误差及判读主观性缺陷并能够甄别染色强度的差异的具有内参照的免疫组化载玻片。

本发明所要解决的技术问题之二在于，提供一种所述具有内参照的免疫组化载玻片的制备方法。

本发明所要解决的技术问题之三在于，提供一种所述具有内参照的免疫组化载玻片用于免疫组化检测的应用。

为解决上述技术问题之一，本发明提供的具有内参照的免疫组化载玻片，包括：

标签标记区、待测样本贴片区和内参照贴片区，其中，所述内参照贴片区固定有含有阳性表达内参照和阴性表达内参照的细胞免疫芯片，所述阳性表达内参照为稳定表达目标抗体相应抗原的细胞株，所述阴性表达内参照为稳定不表达目标抗体相应抗原的细胞株。

具体的，所述细胞免疫芯片可以含有多种阳性表达内参照。一种优选的方式是，细胞免疫芯片至少含有三种阳性表达内参照，所述至少三种阳性表达内参照至少包括稳定表达目标抗体相应抗原强度为弱阳性染色(淡黄色)、中等阳性染色(棕黄色)以及强阳性染色(棕褐色)的细胞株。

具体的，所述细胞免疫芯片可以含有至少一种阴性表达内参照。一种优选的方式是，细胞免疫芯片只含有一种阴性表达内参照，该阴性表达内参照为稳定不表达目标抗体相应抗原的细胞株(抗体无显色)。

具体的，所述具有内参照的免疫组化载玻片还具有名称标记区，用于标识该具有内参照的免疫组化载玻片所对应的目标抗体的名称。

具体的，所述稳定表达目标抗体抗原的细胞株和稳定不表达目标抗体相应抗原的细胞株均选自国内外细胞库标准品。