[发明专利]抑制植物病源真菌的倍半萜类化合物及其制备方法

说明书

本发明的目的在于提供一类能够抑制植物病源真菌的倍半萜类化合物及其制备方法，进而在农业上可用来防治农作物病害。本发明还提供了层生镰刀菌(Fusarium proliferatum AF‑04)(GenBank accession number MF426031)发酵提取物中倍半萜类化合物的制备方法：将PDA(Potato Dextrose Agar)培养基中的AF‑04菌株切成0.5～1cm×0.5～1cm小块后接种到大米固体培养基中，恒温培养箱25～27℃静置培养30～40天，获得发酵物；将该发酵物用乙酸乙酯超声提取30～35分钟，提取液经浓缩、分离得到无色油状物，即倍半萜类化合物。

技术领域

本发明属于生物技术和化学领域，尤其涉及层生镰刀菌发酵提取物中抑制植物病源真菌倍半萜类化合物的制备方法。

背景技术

植物病原真菌(plant pathogenic fungi)是指那些可以寄生在植物上并引起植物病害的真菌。由植物病原真菌引起的病害，约占植物病虫害的70～80％，一种作物上可发现几种甚至几十种真菌病害。农作物及经济作物病虫害是我国的主要农业灾害之一，它具有种类多、影响大、并时常暴发成灾的特点，其发生范围和严重程度对我国国民经济、特别是农业生产常造成重大损失。我国农作物和经济作物常见的有以下种类的病害：麦类赤霉病、玉米弯孢病、棉花枯萎病、苹果腐烂病和炭疽病、烟草赤霉病等，已成为严重影响我国农业生产的重大病害。

化学防治法是使用农药防治植物病害的方法。化学农药具有高效、速效、使用方便、经济效益高等优点。但使用不当可对植物产生药害、污染环境、引起人畜中毒、杀伤有益微生物、导致病原物产生抗药性。

生物农药是指利用生物活体或其代谢产物对有害生物进行防治的一类农药制剂，主要包括生物化学农药和微生物农药(微生物活体农药和微生物代谢产物农药)。但是，在我国农业生产实际应用中，生物农药一般主要泛指可以进行大规模工业化生产的微生物源农药。微生物农药凭借其无公害、无残留、安全高效的特点，将逐步取代传统的化学农药。在人们对农产品的品质要求不断提升的背景之下，微生物农药已经成为无公害农副产品必需的生产资料，针对于此我国需要提高对微生物农药研制和应用的重视程度，加速微生物农药的推广进程，促进我国现代化农业的发展。

微生物农药占我国农业农药总使用量的12％左右。微生物活体农药见效慢且对环境条件(包括温度、水分、光照和pH等)要求较高，而微生物代谢产物农药完全克服了以上化学农药和微生物活体农药的缺点，因此它的市场前景非常乐观。目前我国微生物农药以阿维霉菌、井冈霉菌、Bt制剂等为主，种类稀少。因此，寻找新型微生物次生代谢产物，进而从根本上防治农作物病虫害迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于提供一类能够抑制植物病源真菌的倍半萜类化合物及其制备方法，进而在农业上可用来防治农作物病害。

本发明所述的倍半萜类化合物结构式如下所示：

本发明还提供了层生镰刀菌(Fusarium proliferatum AF-04)(GenBankaccession number MF426031)发酵提取物中倍半萜类化合物的制备方法：将PDA(PotatoDextrose Agar)培养基中的AF-04菌株切成0.5～1cm×0.5～1cm小块后接种到大米固体培养基中，恒温培养箱25～27℃静置培养30～40天，获得发酵物；将该发酵物用乙酸乙酯超声提取30～35分钟，提取液经浓缩、分离得到无色油状物，即倍半萜类化合物。

上述提取液浓缩、分离的过程为：将乙酸乙酯提取液在低于45℃下减压浓缩得到发酵物浸膏，经正相硅胶、葡聚糖凝胶、反相硅胶柱层析分离纯化，获得无色油状物。

上述PDA培养基的配比为：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂15克，去离子水1000mL。上述大米固体培养基的配比为：大米100～120克，去离子水120～150mL。