[发明专利]一种乳浆草总黄酮提取物及其制备方法和抗肿瘤活性应用

说明书

技术领域

本发明属于制药技术领域，涉及乳浆草总黄酮提取物及其制备方法，以其为原料制得的抗肿瘤及抗肿瘤辅助新药的应用，能够有效地抑制肿瘤生长，达到治疗肿瘤的用途。

背景技术

癌症是严重威胁人类生命健康的一类常见病和多发病，是世界性难治疾病，许多国家肿瘤死亡率居各种死因之首位。临床上传统化疗药物属于细胞毒性药物，细胞毒药物在杀死肿瘤细胞的同时，也破坏了人体正常细胞，其选择性低、毒性大，长期用药可带来严重晚期合并症即二次肿瘤的发生，尤其是引起急性非淋巴细胞性白血病和骨髓增生异常综合征等严重毒副作用。现代的医学研究证明，中草药中蕴藏着治疗肿瘤的一个非常大的化合物库，目前很多的化疗药物直接来源于这些中草药组份的纯化，或以其为前体进行改造，制出强效、副作用小的抗肿瘤药物。有效部位中药(中药五类新药)由于既能体现中药多成分、多靶点、多途径发挥药效的特点，又能使药物有效成分更加富集，药理作用和临床疗效增强，以及利于质量控制等优势，近年来成为中药、天然药新药开发的重要方向之一。

乳浆草为大戟科植物乳浆大戟Euphorbia esula L.的干燥地上部分，分布于全国(除海南、贵州、云南和西藏外)，生于路旁、杂草丛、山坡、林下、河沟边、荒山、沙丘及草地，具有拔毒、散结、通便、利尿等功效，民间用于治疗无名肿毒、骨结核、淋巴结结核、水肿、牛皮癣和疥疮等，其为吉林省法定地方药材，原标准收载于吉林省药品标准1977年版。目前有关该药材成分分析研究方面的文献报道极少，有学者从乳浆大戟中分离出3个二萜化合物^[1]；乳浆大戟乙酸乙酯提取物分离得到槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷3个黄酮单体化合物^[2]。药理研究方面，有关乳浆大戟体外抗肿瘤细胞研究报道中提及乳浆大戟醇提物可通过线粒体途径上调bax及下调bcl-2的表达，诱导人肺癌细胞A549凋亡，从而抑制A549细胞的增殖，起到抗肺癌作用^[3][4]；乳浆大戟醇提物通过下调Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达和上调P21的表达，使HeLa细胞阻滞在G₀/G₁期，进而显著抑制宫颈癌HeLa细胞生长和增殖，诱导细胞依赖线粒体通路的凋亡性死亡^[5]。而对其总黄酮提取物制备方法的研究及其体内抗肿瘤试验研究尚属空白，本发明将填补上述空白，为乳浆草药材的综合开发利用提供更广阔的思路。

发明内容

本发明的目的是提供一种乳浆草总黄酮提取物及其制备方法和抗肿瘤活性应用，还提供以其为原料制得的抗肿瘤及抗肿瘤辅助新药，能够有效地抑制肿瘤生长，达到治疗肿瘤的用途。

乳浆草总黄酮提取物是从大戟科植物乳浆大戟的干燥地上部分中提取获得的，总黄酮含量为20％～100％。

本发明提供的一种乳浆草总黄酮提取物及其制备方法优选，包括下列步骤：

(1)提取：取乳浆草(乳浆大戟地上干燥部分)，酌予碎断，加水煎煮，控制加入水量、提取时间和提取次数。

(2)分离：合并(1)项下的提取液，趁热滤过，滤液浓缩，将该浓缩液加于已预先处理好的大孔吸附树脂柱中，先用4～12倍树脂柱体积的水洗，再用4～12倍柱装体积、浓度为30～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇后浓缩干燥，得乳浆草总黄酮粗提物。

(3)纯化：用浓度为30～95％的乙醇作溶剂，将粗提物加入重量4～12倍的该溶剂中搅拌10～40分钟，滤过，滤液水浴浓缩至稠膏，减压干燥，制成乳浆草总黄酮提取物。

2、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤(1)所述加入水量为药材量的6～12倍；提取时间为1～3小时；提取次数为1～3次。

3、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述大孔吸附树脂为D₁₀₁、AB-8、D₂₁或黄酮树脂。

4、如权利要求1所述的乳浆草总黄酮提取物在制备抗肿瘤药物及抗肿瘤辅助药物中的应用。

本发明还提供用本发明的乳浆草总黄酮提取物以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的新药制剂。这些制剂选择下述剂型：溶液、混悬液、乳化液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、锭剂口服液、舌下片、泡腾片、注射剂等。这些制剂中，除包括本发明总黄酮提取物，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。