[发明专利]一种有利于鸡冠花愈伤组织花青素积累的继代培养基

说明书

技术领域

本发明涉及植物培植领域，特别涉及一种植物愈伤组织继代培养领域。

背景技术

花青素是植物组织中广泛存在的一类物质，由于其颜色鲜艳，且对人的健康有益，长期以来一直是人们研究、开发和使用的重要天然色素之一。通常使用的花青素都是从植物组织中提取的，其原料来源和产量都受到限制。用培养植物细胞的方法生产花青素可以避免占用大量土地，同时不受季节限制，产量还可以提高，因此近年来为人们所重视。

利用细胞工程技术进行工业化生产所需的次生代谢花青素，关键要建立一个高产、稳产的细胞系。除了物种的种性等内因之外，外界培养条件对愈伤组织生长及次生代谢产物积累的影响也是重要的方面。通过调控培养条件，特别是生长调节剂，可获得较高产且稳定的次生代谢产物花青素。研究资料表明，花青素的合成在不同植物组织中所需要的生长调节剂类型和浓度都不同，因而生长调节剂类型及浓度选择直接影响培养基对植物组织的培植情况，现市面上仍没有一种可有效促进鸡冠花愈伤组织花青素积累的继代培养基。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种有利于鸡冠花愈伤组织花青素积累的继代培养基，其可大大提高鸡冠花愈伤组织的花青素含量和花青素产量。

本发明所采取的技术方案是：一种有利于鸡冠花愈伤组织花青素积累的继代培养基，其包括B5基本培养基和复合生长调节剂，所述复合生长调节剂由浓度为1mg/L的BA和浓度为2mg/L的IAA组成。

作为上述方案的进一步改进，所述B5基本培养基中的蔗糖量为40g/L，琼脂量为6g/L，pH值为5.8～6。具体地，该条件下的B5基本培养基，保证了对鸡冠花愈伤组织生长所需养分的供给。

作为上述方案的进一步改进，所述B5基本培养基经121℃高温灭菌处理，其高温灭菌处理时间为15～20min。具体地，经灭菌处理过的B5基本培养基能有效防止细菌感染导致继代培养中鸡冠花愈伤组织无法正常生长。

本发明的有益效果是：本发明通过浓度为1mg/L的BA和浓度为2mg/L的IAA复配作为复合生长调节剂，使得该继代培养基能有利于鸡冠花愈伤组织花青素的积累，进而大大地提高了鸡冠花愈伤组织的花青素含量和花青素产量。

附图说明

本发明附图1为不同浓度的BA对花青素积累的影响；

本发明附图2为不同浓度的IAA对花青素积累的影响。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行具体描述，以便于所属技术领域的人员对本发明的理解。有必要在此特别指出的是，实施例只是用于对本发明做进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术熟练人员，根据上述发明内容对本发明作出的非本质性的改进和调整，应仍属于本发明的保护范围。同时下述所提及的原料未详细说明的，均为市售产品；未详细提及的工艺步骤或制备方法为均为本领域技术人员所知晓的工艺步骤或制备方法。

一种有利于鸡冠花愈伤组织花青素积累的继代培养基，其包括B5基本培养基和复合生长调节剂，所述复合生长调节剂由浓度为1mg/L的BA和浓度为2mg/L的IAA组成。

进一步作为优选的实施方式，所述B5基本培养基中的蔗糖量为40g/L，琼脂量为6g/L，pH值为5.8～6。具体地，该条件下的B5基本培养基，保证了对鸡冠花愈伤组织生长所需养分的供给。

进一步作为优选的实施方式，所述B5基本培养基经121℃高温灭菌处理，其高温灭菌处理时间为15～20min。具体地，经灭菌处理过的B5基本培养基能有效防止细菌感染导致继代培养中鸡冠花愈伤组织无法正常生长。

本发明用以试验的继代培养方法如下：

将由植物组织培养室诱导生长并保存的鸡冠花组织JSA10洋红系列作为本发明进行各项试验的材料。

取色泽鲜艳疏松的上述新鲜愈伤组织，在超净工作台上用镊子小心地放入待试验的培养基中。每16天继代一次。接种量为1g鲜重。本发明以B5培养基作为基本培养基，该基本培养基中蔗糖量为40g/L，琼脂量6g/L，pH5.8～6.0，且本发明用以试验的基本培养基均经121℃高温灭菌15～20min。

继代培养条件：温度25±2℃，以白色荧光灯作为光源，光强25μmol·m^-2·s^-1，光照周期14h/d，培养时间为15天。