[发明专利]一种枸杞多糖、其制备方法及用途有效
申请号: | 201710711572.4 | 申请日: | 2017-08-18 |
公开(公告)号: | CN109400730B | 公开(公告)日: | 2021-08-31 |
发明(设计)人: | 丁侃;周立爽;黄陆林 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海药物研究所 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P35/00 |
代理公司: | 北京金信知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 刘锋;郑丹 |
地址: | 201203 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 枸杞 多糖 制备 方法 用途 | ||
1.一种硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其由具有以下结构式的枸杞多糖LBP1B-S-2硫酸化得到:
其中,n为2-91的整数,
其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2通过包括以下步骤的制备方法来制备:
a.多糖提取:干燥的枸杞果实,粉碎、酶-水联提、灭酶,离心,将所得滤液浓缩,透析,浓缩,离心,醇沉,离心,洗涤,真空干燥,得酶-水联提枸杞粗多糖;
b.多糖纯化:取酶-水联提枸杞粗多糖,水溶解,离心,上清液经DEAE SepharoseTM FastFlow阴离交换柱进行初步分级纯化,依次以水、0.05M、0.1M及0.2M氯化钠洗脱,收集0.1M氯化钠洗脱组分,得枸杞多糖LBP1B,再将LBP1B溶于0.2M氯化钠中,离心,上清液经SephacrylHR S-300凝胶色谱柱分离,收集洗脱组分,浓缩,透析,冷冻干燥,得所述枸杞多糖LBP1B-S-2。
2.根据权利要求1所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的重均分子量的范围为14-640kDa。
3.根据权利要求2所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的重均分子量的范围为40-200kDa。
4.根据权利要求3所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的重均分子量的范围为60-100kDa。
5.根据权利要求1所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的单糖组成包括阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和鼠李糖,阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和鼠李糖的质量比为53.55:39.37:3.95:3.13。
6.根据权利要求1所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的红外特征图谱的主要伸缩振动吸收峰与图1所示的红外图特征图谱中的基本一致。
7.根据权利要求1所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2的13C NMR谱的主要信号值与图2所示的13C NMR谱基本一致。
8.根据权利要求1所述的硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2,其中,所述枸杞多糖LBP1B-S-2通过包括以下步骤的制备方法来制备:
a.多糖提取:干燥的枸杞果实经粉碎机粉碎,加入15-30倍重量的去离子水,于55-60℃下,再分别加入枸杞重量的3%纤维素酶、枸杞重量的1%淀粉酶及枸杞重量的0.5%木瓜蛋白酶提取1h,后将温度升至100℃使酶失活,离心,滤液浓缩,透析,再浓缩,加入五倍于浓缩液体积的95%乙醇,离心得沉淀,沉淀经无水乙醇与丙酮交替洗涤各三次,经干燥得酶-水联提枸杞粗多糖;
b.多糖纯化:取酶-水联提枸杞粗多糖,水溶解,离心,上清液经DEAE SepharoseTM FastFlow阴离交换柱进行初步分级纯化,依次以水、0.05M、0.1M及0.2M氯化钠洗脱,收集0.1M氯化钠洗脱组分,得枸杞多糖LBP1B,再将LBP1B溶于0.2M氯化钠中,离心,上清液经SephacrylHR S-300凝胶色谱柱分离,收集洗脱组分,浓缩,透析,冷冻干燥,得所述枸杞多糖LBP1B-S-2。
9.权利要求1所述硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
氯磺酸和吡啶按体积比1:3/v:v制备硫酸化试剂,将所述枸杞多糖LBP1B-S-2与硫酸化试剂于60℃反应,反应结束后经NaOH中和,饱和NaHCO3透析、去离子水透析、冷冻,干燥后得到硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2。
10.权利要求1所述硫酸化多糖衍生物Sul-LBP1B-S-2在制备抗血管生成药物中的用途。
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