[发明专利]3,7-二羟基卓酚酮生物合成基因簇及其应用有效

专利信息
申请号: 201710719271.6 申请日: 2017-08-21
公开(公告)号: CN107699581B 公开(公告)日: 2020-12-29
发明(设计)人: 陶美凤;陈雪斐;徐敏;王业民;邓子新 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/52 分类号: C12N15/52;C12N9/00;C12N1/21;C12P7/26;C12R1/465
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中;陈少凌
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 羟基 卓酚酮 生物 合成 基因 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇,其特征在于,所述基因簇的碱基序列如SEQ ID NO.1所示;所述基因簇包括编码3,7-二羟基卓酚酮生物合成所涉及的10个基因:

S1、负责3,7-二羟基卓酚酮生物合成的结构基因,为trlAtrlBtrlCtrlDtrlEtrlFtrlH以及trlI;其中,

trlA位于如SEQ ID NO.1所示序列的第1-480位,编码酰基辅酶A脱水酶,大小为159个氨基酸;

trlB位于如SEQ ID NO.1所示序列的第530-1984位,编码3-脱氧-D-阿糖基庚酮酸-7-磷酸合成酶,大小为484个氨基酸;

trlC位于如SEQ ID NO.1所示序列的第2248-3840位,编码单加氧酶,大小为530个氨基酸;

trlD位于如SEQ ID NO.1所示序列的第3837-4394位,编码黄素还原酶,大小为185个氨基酸;

trlE位于如SEQ ID NO.1所示序列的第4439-5641位,编码单加氧酶,大小为400个氨基酸;

trlF位于如SEQ ID NO.1所示序列的第5697-6308位,编码氧化酶,大小为203个氨基酸;

trlH位于如SEQ ID NO.1所示序列的第6536-7297位,编码硫酯酶,大小为253个氨基酸;

trlI位于如SEQ ID NO.1所示序列的第7299-8508位,编码预苯酸脱水酶-分支酸变位酶双功能酶,大小为402个氨基酸;

S2、负责3,7-二羟基卓酚酮生物合成的调控基因trlJ;

trlJ位于如SEQ ID NO.1所示序列的第8483-9112位,编码TetR家族转录调控蛋白,大小为209个氨基酸;

S3、其他功能蛋白基因trlG;

trlG位于如SEQ ID NO.1所示序列的第6327-6539位,编码其他功能蛋白,大小为70个氨基酸。

2.一种如权利要求1所述的3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇编码的蛋白。

3.一种如权利要求1所述的3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇或其编码的蛋白在催化合成3,7-二羟基卓酚酮中的用途。

4.一种含有权利要求1所述的3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇的表达载体。

5.一种基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株携带如权利要求1所述的3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇。

6.一种基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株携带如权利要求1所述的3,7-二羟基卓酚酮的生物合成基因簇,且其中的trlC基因、trlD基因、trlE基因或trlF基因被失活。

7.一种中断单加氧酶合成基因trlC的天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)M1154/pCXF6 ,其保藏编号为CGMCC No. 13918。

8.一种中断黄素还原酶合成基因trlD的天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)M1154/pCXF7,其保藏编号为CGMCC No. 13919 。

9.一种中断单加氧酶合成基因trlE的天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)M1154/pCXF8,其保藏编号为CGMCC No. 13920。

10.一种中断氧化酶合成基因trlF的天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)M1154/pCXF9,其保藏编号为CGMCC No. 13921 。

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