[发明专利]自组装法制备白藜芦醇二聚体δ-viniferin纳米制剂的方法

说明书

本发明公开了一种自组装法制备白藜芦醇二聚体δ‑viniferin纳米制剂的方法。将普朗尼克与白藜芦醇二聚体混合溶解于有机溶剂中，将混合溶液匀速滴入高速搅拌的生理盐水中，利用自组装法直接构建获得载药的纳米粒子分散液；透析去除溶剂和其他可溶性小分子；向纳米粒子分散液中加入冻干保护剂，获得纳米制剂溶液；再通过冷冻干燥法将纳米制剂溶液中的水分去除。该方法可克服白藜芦醇二聚体δ‑viniferin存在水溶性差的不足，提高其在水中的分散度，显著增强其在体内的稳定性，有效提高生物利用度，发挥治疗效果。该制备方法简单可靠，具有非常好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种纳米制剂的制备工艺，具体涉及一种自组装法制备白藜芦醇二聚体δ-viniferin纳米制剂的方法。

背景技术

白藜芦醇二聚体是白藜芦醇被4-羟基芪过氧化物酶氧化所形成的低聚物，主要有δ-viniferin和ε-viniferin两种结构的白藜芦醇脱氢二聚体。其中δ-viniferin对霜霉病菌的杀伤力是ε-viniferin的6倍，被认为是葡萄抵抗霜霉病的重要抗性标志。δ-viniferin具有多种药理学活性，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病及心血管保护作用。尉亚辉等研究发现，与白藜芦醇相比，δ-viniferin具有较强的扩血管作用，能明显增大正常小鼠耳廓微细动静脉口径，改善微循环，对微循环障碍可发挥积极的治疗作用。然而，δ-viniferin由于分子量较大，降低了机体对其吸收效果。另外，药物分子在水相中的可溶性，是药物通过胃肠道，进入血液，到达体内器官及细胞的保证。然而，δ-viniferin在水中的溶解度极低，导致该化合物的生物利用度减低。因此，提高δ-viniferin水溶性，从而增强其生物利用度是δ-viniferin开发为心血管药物所必须解决的问题。

纳米药物载体可有效提高疏水性药物在水中的溶解度以及体内稳定性，延长体内循环时间，实现靶向递送，从而达到提高生物利用度、降低毒副作用的目的，是克服难溶性药物使用障碍的重要方法之一。此外纳米药物载体还具有比表面积大，表面反应活性高，易于修饰等诸多优点。两亲性材料可通过自组装形成核壳式结构的纳米胶束，内核是疏水性超微结构，可以包裹疏水性药物，而外壳则是由一些多糖或者高分子聚合物的亲水骨架构成，由于亲水段具有生物相容性，对纳米粒子起立体稳定作用。此类纳米药物载体可以通过自组装的方法制备获得。

普郎尼克是由聚氧乙烯和聚氧丙烯醚组成的嵌段共聚物，是一种非离子型两亲性高分子化合物，具有生物相容性好、毒性低、无刺激过敏性等诸多优势。其中L44、F68、F87、F108、F127五种规格已被FDA批准进行临床应用，可用于多种剂型的制备。

Glen S.Kwon等人申请了利用成膜法制备普郎尼克胶束的专利(专利号：US2012032115A1)。但该方法无法用于大规模生产，原因在于成膜必须在容器内完成，导致成膜量比较低，而不同批次存在质量控制方面的隐患。在国内，沙先谊等人利用普朗尼克与难溶性药物甲氨蝶呤进行化学交联获得共聚物，再与普朗尼克类物质混合制备获得载药胶束(申请号：201110287095.6)，但是该方法材料制备过程复杂，包裹过程依旧是需要成膜去掉有机溶剂之后再分散。詹勇华等人制备了白藜芦醇纳米制剂，并申请获得一项专利(CN103142457A)，然而白藜芦醇二聚体δ-viniferin纳米制剂方面仍然存在空白。

由于白藜芦醇二聚体δ-viniferin在水中的溶解性极差，导致其在体内的生物利用度很低。同时，白藜芦醇二聚体δ-viniferin在水中极易絮凝。因此，在普朗尼克包裹过程以及冻干制剂重溶后，很难获得稳定的小粒径纳米颗粒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种自组装法制备白藜芦醇二聚体δ-viniferin纳米制剂的方法。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

该制备白藜芦醇二聚体δ-viniferin纳米制剂的方法，包括以下步骤(以下步骤一至四一般于室温下进行)：