[发明专利]一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制方法

权利要求书

1.一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制方法，其特征在于：采用一标多测法，以天麻素作为内标物，检测天麻药材及其饮片与提取物中对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E的质量，具体包括以下步骤：

（1）制备天麻供试品溶液；

（2）制备天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E单一对照品溶液和混合对照品溶液；

（3）分别吸取步骤（2）所述的单一对照品溶液和混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测试，根据公式R_m/k=t_R(m)/t_R(k)（式中t_R(m)为其它组分m的保留时间，tR(k)为内标物的保留时间），计算对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E相对于内标物天麻素的相对保留时间；

（4）吸取步骤（2）所述的混合对照品溶液，进样1、2、4、6、8、12 μL，注入高效液相色谱仪，测定，记录各成分峰面积，根据相对校正因子计算公式f_km=f_k/f_m=(W_k×A_m)/(W_m×A_k)(式中A_k为内标物峰面积，W_k为内标物质量；A_m为其它组分m峰面积，W_m为其它组分m质量)，以天麻素为内参物，计算其他5种成分的相对校正因子f_km；

（5）分别吸取步骤（1）所述的供试品溶液和步骤（2）所述的天麻素对照品，注入高效液相色谱仪，测定，对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E通过步骤（3）所述的相对保留时间进行定性，通过步骤（4）所述的相对校正因子计算各自的含量。

2.根据权利要求1所述的一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的色谱条件为：采用C18色谱柱，流动相：乙腈(A)-体积分数0.02～0.1%酸水溶液(B)，采用梯度洗脱：0 min～5 min,2%A；5 min～20 min,2%～30%A,20 min～25 min,30%～2%A；检测波长：220 nm；体积流量：0.8～1.2mL•min^-1；进样量为5～25μL；柱温：20～35 ℃。

3.根据权利要求2所述的一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制方法，其特征在于，流动相为乙腈-酸水溶液，酸优选为磷酸，其体积分数为0.05%；体积流量为1.0 mL•min^-1，进样量为10μL，柱温为25℃。

4.根据权利要求1所述一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制的方法，其特征在于，步骤（3）所述对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E相对于内标物天麻素的相对保留时间分别为：1.3480、1.8173、1.684 6、1.7286、1.6443。

5.根据权利要求1所述一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制的方法，其特征在于，步骤（4）所述对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E与天麻素的相对校正因子分别为：0.6632、1.2777、1.4351、1.3885，1.5907。

6.根据权利要求1所述一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制的方法，其特征在于，步骤（1）所述天麻供试品溶液的制备方法为：精密称取天麻药材、天麻饮片或天麻提取物，加入15～25倍体积分数为60%～80%的乙醇，加热回流提取40～60min，滤过，取10倍量续滤液，浓缩至近干无醇味，残渣加水溶解，转移至25 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液过0.22μm滤膜，得供试品溶液。

7.根据权利要求1所述一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制的方法，其特征在于，步骤（2）所述天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E单一对照品溶液和混合对照品溶液，溶剂为水，各物质的质量浓度为0.01～0.2mg/mL。

8.根据权利要求1所述一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制的方法，其特征在于，所述的天麻提取物为水提取或者乙醇提取物。