[发明专利]易于操作的甲胎蛋白试剂盒

说明书

本发明涉及一种易于操作的甲胎蛋白试剂盒，同时本发明还涉及测定甲胎蛋白AFP浓度的方法、测定试剂组成及成分，属于医学检验测定技术领域。本发明的试剂盒主要成分包括：红细胞裂解液、磷酸缓冲液PBS、甲胎蛋白AFP标准品、甲胎蛋白AFP核酸适体荧光探针；通过血样裂解、混合卵育处理，结合荧光分光光度计检测，从而测算出甲胎蛋白AFP的浓度大小。本发明具有样品处理简单，操作简便，检测时间短，检测特异性强，灵敏度高，检测结果重复性高等优点。

技术领域

本发明属于医学检验测定技术领域，特别是涉及基于核酸适体荧光探针AFP5的甲胎蛋白试剂盒及其检测方法。

背景技术

甲胎蛋白（AFP）是一种糖蛋白，正常情况下，这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生后约两周甲胎蛋白从血液中消失，因此正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到20微克/升。甲胎蛋白在产妇羊水或母体血浆中AFP可用于胎儿产前监测。如在神经管缺损、脊柱裂、无脑儿等时，AFP可由开放的神经管进入羊水而导致其在羊水中含量显著升高。胎儿在宫腔内死亡、畸胎瘤等先天缺陷亦可有羊水中AFP增高。AFP可经羊水部分进入母体血循环。在85%脊柱裂及无脑儿的母体，血浆AFP在妊娠16-18周可见升高而有诊断价值，但必须与临床经验结合，以免出现假阳性的错误。

检测甲胎蛋白的方法有好几种，放射免疫法测得的甲胎蛋白大于 甲胎蛋白 500微克/升、且持续4周者，或甲胎蛋白在200～500微克/升、持续8周者，在排除其它引起甲胎蛋白增高的因素如急、慢性肝炎、肝炎后肝硬化、胚胎瘤、消化道癌症后，需再结合定位检查，如B超、CT、磁共振（MRI）和肝血管造影等即可作出诊断。不过，正常怀孕的妇女、少数肝炎和肝硬化、生殖腺恶性肿瘤等情况下甲胎蛋白也会升高，但升高的幅度不如肝癌那样高。肝硬化病人血清甲胎蛋白浓度多在25～200微克/升之间，一般在2 个月内随病情的好转而下降，多数不会超过2个月；同时伴有转氨酶升高，当转氨酶下降后甲胎蛋白也随之下降，血清甲胎蛋白浓度常与转氨酶呈平行关系。如果甲胎蛋白浓度在 500 微克/升以上，虽有转氨酶升高，但肝癌的可能性大，转氨酶下降或稳定，而甲胎蛋白上升，也应高度怀疑肝癌。

甲胎蛋白在肝癌出现症状之前的8个月就已经升高，此时大多数肝癌病人仍无明显症状，肿瘤也较小，这部分患者经过手术治疗后，预后可得到明显改善，故肝硬化、慢性肝炎病人、家族中有肝癌患者的人应半年检测一次。

目前没有能够直接识别甲胎蛋白的抗体和其它分子探针。因此设计一种高度设别甲胎蛋白的分子探针，并基于此建立简单快速和廉价的检测方法将提高对肝癌和胎儿先天病等于甲胎蛋白相关的疾病的的监控。