[发明专利]一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精的方法

权利要求书

1.一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于，样品前处理包括以下步骤：

一、取待检测样品，加入水或缓冲液，漩涡振荡并于4℃孵育过夜；

二、均质后加入乙腈，漩涡振荡后进行离心，分层后收集上清液；将上清液蒸发干燥，溶解于水中获得预处理样品；

三、上述预处理样品通过固相微萃取柱进行萃取，先依次用甲醇、水润洗所述的固相微萃取柱；

四、将步骤三的预处理样品上柱；

五、依次用水、体积百分含量为1~3%甲酸/水溶液及体积百分含量为100%甲醇洗涤微萃取柱；

六、用配制的质量体积百分含量为3~7% NH₄OH/甲醇溶液洗脱，获得样品洗脱液；

七、将样品洗脱液蒸发干燥，溶解于含体积百分含量为0.1~0.3%甲酸以及体积百分含量为3~7%甲醇的水溶液中，得到所需的待测样液；所述的固相微萃取柱为DPX-CX枪头分散式固相微萃取柱；

液-质联用快速检测瘦肉精含量的方法，它是按照以下步骤进行的：

一、采用上述样品前处理的方法获得待测样液，备用；

二、采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对待测样液中含有的β-受体激动剂进行检测；

三、所述高效液相色谱的检测条件为：

a.色谱柱： C18柱；

b.流动相：A：0.1%甲酸/水，B：0.1%甲酸/乙腈；

c.流速：0.5 mL/min；

d.柱温：35℃；

e.进样量：20 µL；

所述的流动相洗脱方式为梯度洗脱：第0min，流动相： 96% A相+ 4% B相；第2min，流动相： 92% A相+ 8% B相；第6min，流动相： 60% A相+ 40% B相；第7.5min，流动相： 5% A相+95% B相；第8.5min，流动相： 96% A相+ 4% B相；

四、所述质谱条件为：

a.电喷射电压：4000V；

b.辅助气体压力：8 psi；

c.鞘气压力：30 psi；

d.喷雾器温度：300 ℃；

e.毛细管温度：300 ℃；所述的瘦肉精为盐酸莱克多巴胺、盐酸异克舒令、盐酸克伦特罗、西布特罗、特布他林、西马特罗、沙丁胺醇、马贲特罗、马布特罗和盐酸溴布特罗。

2.根据权利要求1所述的一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于步骤五依次用水、体积百分含量为2%甲酸/水溶液及体积百分含量为100%甲醇洗涤微萃取柱。

3.根据权利要求1所述的一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于步骤六用配制的质量体积百分含量为5%NH₄OH/甲醇溶液洗脱，获得样品洗脱液。

4.根据权利要求1所述的一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于步骤七将样品洗脱液蒸发干燥，溶解于含体积百分含量为0.1%甲酸以及体积百分含量为5%甲醇的水溶液中，得到所需的待测样液。

5.根据权利要求1所述的一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于所述的C18柱为安捷伦的Poroshell EC- C18柱。

6.根据权利要求5所述的一种利用DPX枪头式分散固相微萃取柱萃取及分析β-受体激动剂类瘦肉精含量的检测方法，其特征在于所述的安捷伦的Poroshell EC- C18柱的尺寸为3.0 × 50 mm, 2.7 µm。