[发明专利]一种猪血的酶解方法有效
申请号: | 201710733969.3 | 申请日: | 2017-08-24 |
公开(公告)号: | CN107488694B | 公开(公告)日: | 2018-10-19 |
发明(设计)人: | 章斌;侯小桢;王忠合;陈晓芸 | 申请(专利权)人: | 韩山师范学院 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 刘晔 |
地址: | 521041*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血红细胞 冷冻离心 酶解 蛋白酶解产物 抗凝血剂 上清液 制备 种猪 蛋白酶解物 蛋白酶水解 碱性蛋白酶 抗氧化活性 磷酸缓冲液 超声破碎 搅拌混匀 冷冻保存 酶法制备 酶解产物 破碎处理 水浴加热 新鲜猪血 血浆收集 水解物 冰浴 灭酶 血浆 备用 沉淀 细胞 保存 | ||
本发明提供了一种猪血的酶解方法,该方法在猪血红细胞破碎处理方式的基础上,用酶法制备猪血红蛋白酶解产物,该方法简单、易操作,制得的酶解产物抗氧化活性好。所述的酶解方法为:(1)猪血红细胞的制备:取新鲜猪血并加入抗凝血剂,于4℃保存;然后冷冻离心,得血红球和血浆;去血浆收集血红球并加入抗凝血剂搅拌混匀,再冷冻离心,去上清液取沉淀,即得猪血红细胞,于‑18℃冷冻保存备用;(2)猪血红蛋白酶解物的制备:取猪血红细胞,按10%的细胞浓度加入碱性蛋白酶的磷酸缓冲液,冰浴中超声破碎处理,后水浴加热,然后加蛋白酶水解,灭酶,后将水解物于4000r/min冷冻离心10min,上清液即为猪血红蛋白酶解产物。
1、技术领域
本发明属于猪血的加工、利用领域,具体涉及一种猪血的酶解方法。
2、背景技术
我国是一个畜牧业大国,随着畜禽养殖的迅猛发展,副产物随之大量增加,这些副产物的深加工必须跟上养殖业的发展步伐,才能提高畜禽养殖的经济效益,减少资源浪费,促进畜牧产业持续、快速、健康、稳定地发展。因此,加强畜禽副产物的开发利用具有十分重要的意义。畜禽副产物的开发利用主要包括对畜禽的血液、骨、内脏、皮毛、蹄等的综合加工利用。目前,利用畜禽的副产品进行生化制药,已发展成与现代生物科技紧密结合的一项高科技产业,如何发展更多高科技含量高、附加值高的畜禽副产品利用项目,已成为畜禽副产品研究、开发的重点。因饮食习惯等原因,猪肉是我国居民消费量最多的一类肉。而猪血是一个巨大的动物蛋白资源库,但目前猪血的利用率不高,许多猪血资源白白流失,这不仅是巨大的浪费,同时对环境也造成了一定的污染。如何更好地开发猪血资源,使其丰富的营养得到更充分的利用,同时最大限度地减少对环境的污染,是摆在我们面前的一个课题。因此利用现代高新技术,开发具有高附加值的猪血产品,进一步提高猪血的利用率,对动物血液制品的工业化和生态环境的保护都具有重要意义。
猪血富含蛋白质和氨基酸,以及适量的矿物质、维生素、激素、酶类和其它一些生物活性物,是一种高蛋白、低脂肪、低糖而微量元素含量丰富的食品工业副产品,素有“液态肉”之称。猪血作为猪肉消费量逐年增加的大宗副产物,是制备生物活性肽的良好经济来源;研究表明猪血血红蛋白肽具有提高免疫力、降血压血脂、调节胃肠和抗氧化等功能,在食品、饲料、医药等领域显示出良好的应用前景。
发明专利申请CN201110068741.X公开了一种猪血球蛋白酶解物的生产方法,包括以下步骤:(1)采集:取新鲜猪血加入猪血体积4.5‰-6.0‰的抗凝剂抗凝;(2)分离:将抗凝后的猪血用管式分离机进行分离,分离出血浆液和血球液;(3)溶血:将上述血球液加0.8-2.5 倍水稀释得到血球溶解液,在低渗情况下使红细胞膜破裂释放出血红蛋白;(4)酶解:向上述血球溶解液中添加血球液重量2.0‰-6.0‰的动物蛋白水解酶进行酶解反应得到酶解液; (5)离心:分别使用三足离心机及管式固液分离机对上述酶解液进行离心,得到上清液,去掉残渣;(6)脱色:将上述上清液进行脱色,得到脱色液;(7)离心:分别使用三足离心机、管式固液分离机对上述脱色液进行离心,取除活性炭得到上,清液;(8)喷雾干燥:将离心得到的上清液进行喷雾干燥即得到最终的成品。该制备方法复杂,步骤长。
时亚文等.猪血红蛋白的酶解工艺研究.食品与药品,2013,15(6):390公开了猪血红蛋白的酶解工艺研究,公开了血红蛋白酶解液的制备方法:新鲜血细胞液进行溶血后酶解,然后酶灭活,再进行离心制得血红蛋白酶解液。用组合酶Ⅰ(蛋白酶F与蛋白酶P)和组合酶Ⅱ (蛋白酶F与蛋白酶N)同步酶解猪血红蛋白。研究表明,组合酶Ⅰ的最佳酶解条件为:酶添加量0.2%,温度50℃,料水比1:1.25,pH 7.5,水解时间20h;组合酶Ⅱ的最佳酶解条件为:酶添加量0.24%,温度50℃,料水比1:1.75,pH 8.0,酶解时间20h。该方法既没有公开使用何种蛋白酶,且酶解的时间长,长达20h。
3、发明内容
本发明提供了一种新的猪血的酶解方法,该方法在猪血红细胞破碎处理方式的基础上,用酶法制备猪血红蛋白酶解产物,该方法简单、易操作,制得的酶解产物抗氧化活性好。
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