[发明专利]一种猪血的酶解方法有效

专利信息
申请号: 201710733969.3 申请日: 2017-08-24
公开(公告)号: CN107488694B 公开(公告)日: 2018-10-19
发明(设计)人: 章斌;侯小桢;王忠合;陈晓芸 申请(专利权)人: 韩山师范学院
主分类号: C12P21/06 分类号: C12P21/06
代理公司: 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 代理人: 刘晔
地址: 521041*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 血红细胞 冷冻离心 酶解 蛋白酶解产物 抗凝血剂 上清液 制备 种猪 蛋白酶解物 蛋白酶水解 碱性蛋白酶 抗氧化活性 磷酸缓冲液 超声破碎 搅拌混匀 冷冻保存 酶法制备 酶解产物 破碎处理 水浴加热 新鲜猪血 血浆收集 水解物 冰浴 灭酶 血浆 备用 沉淀 细胞 保存
【说明书】:

本发明提供了一种猪血的酶解方法,该方法在猪血红细胞破碎处理方式的基础上,用酶法制备猪血红蛋白酶解产物,该方法简单、易操作,制得的酶解产物抗氧化活性好。所述的酶解方法为:(1)猪血红细胞的制备:取新鲜猪血并加入抗凝血剂,于4℃保存;然后冷冻离心,得血红球和血浆;去血浆收集血红球并加入抗凝血剂搅拌混匀,再冷冻离心,去上清液取沉淀,即得猪血红细胞,于‑18℃冷冻保存备用;(2)猪血红蛋白酶解物的制备:取猪血红细胞,按10%的细胞浓度加入碱性蛋白酶的磷酸缓冲液,冰浴中超声破碎处理,后水浴加热,然后加蛋白酶水解,灭酶,后将水解物于4000r/min冷冻离心10min,上清液即为猪血红蛋白酶解产物。

1、技术领域

本发明属于猪血的加工、利用领域,具体涉及一种猪血的酶解方法。

2、背景技术

我国是一个畜牧业大国,随着畜禽养殖的迅猛发展,副产物随之大量增加,这些副产物的深加工必须跟上养殖业的发展步伐,才能提高畜禽养殖的经济效益,减少资源浪费,促进畜牧产业持续、快速、健康、稳定地发展。因此,加强畜禽副产物的开发利用具有十分重要的意义。畜禽副产物的开发利用主要包括对畜禽的血液、骨、内脏、皮毛、蹄等的综合加工利用。目前,利用畜禽的副产品进行生化制药,已发展成与现代生物科技紧密结合的一项高科技产业,如何发展更多高科技含量高、附加值高的畜禽副产品利用项目,已成为畜禽副产品研究、开发的重点。因饮食习惯等原因,猪肉是我国居民消费量最多的一类肉。而猪血是一个巨大的动物蛋白资源库,但目前猪血的利用率不高,许多猪血资源白白流失,这不仅是巨大的浪费,同时对环境也造成了一定的污染。如何更好地开发猪血资源,使其丰富的营养得到更充分的利用,同时最大限度地减少对环境的污染,是摆在我们面前的一个课题。因此利用现代高新技术,开发具有高附加值的猪血产品,进一步提高猪血的利用率,对动物血液制品的工业化和生态环境的保护都具有重要意义。

猪血富含蛋白质和氨基酸,以及适量的矿物质、维生素、激素、酶类和其它一些生物活性物,是一种高蛋白、低脂肪、低糖而微量元素含量丰富的食品工业副产品,素有“液态肉”之称。猪血作为猪肉消费量逐年增加的大宗副产物,是制备生物活性肽的良好经济来源;研究表明猪血血红蛋白肽具有提高免疫力、降血压血脂、调节胃肠和抗氧化等功能,在食品、饲料、医药等领域显示出良好的应用前景。

发明专利申请CN201110068741.X公开了一种猪血球蛋白酶解物的生产方法,包括以下步骤:(1)采集:取新鲜猪血加入猪血体积4.5‰-6.0‰的抗凝剂抗凝;(2)分离:将抗凝后的猪血用管式分离机进行分离,分离出血浆液和血球液;(3)溶血:将上述血球液加0.8-2.5 倍水稀释得到血球溶解液,在低渗情况下使红细胞膜破裂释放出血红蛋白;(4)酶解:向上述血球溶解液中添加血球液重量2.0‰-6.0‰的动物蛋白水解酶进行酶解反应得到酶解液; (5)离心:分别使用三足离心机及管式固液分离机对上述酶解液进行离心,得到上清液,去掉残渣;(6)脱色:将上述上清液进行脱色,得到脱色液;(7)离心:分别使用三足离心机、管式固液分离机对上述脱色液进行离心,取除活性炭得到上,清液;(8)喷雾干燥:将离心得到的上清液进行喷雾干燥即得到最终的成品。该制备方法复杂,步骤长。

时亚文等.猪血红蛋白的酶解工艺研究.食品与药品,2013,15(6):390公开了猪血红蛋白的酶解工艺研究,公开了血红蛋白酶解液的制备方法:新鲜血细胞液进行溶血后酶解,然后酶灭活,再进行离心制得血红蛋白酶解液。用组合酶Ⅰ(蛋白酶F与蛋白酶P)和组合酶Ⅱ (蛋白酶F与蛋白酶N)同步酶解猪血红蛋白。研究表明,组合酶Ⅰ的最佳酶解条件为:酶添加量0.2%,温度50℃,料水比1:1.25,pH 7.5,水解时间20h;组合酶Ⅱ的最佳酶解条件为:酶添加量0.24%,温度50℃,料水比1:1.75,pH 8.0,酶解时间20h。该方法既没有公开使用何种蛋白酶,且酶解的时间长,长达20h。

3、发明内容

本发明提供了一种新的猪血的酶解方法,该方法在猪血红细胞破碎处理方式的基础上,用酶法制备猪血红蛋白酶解产物,该方法简单、易操作,制得的酶解产物抗氧化活性好。

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