[发明专利]用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物及应用

说明书

本发明属于分子生物学及遗传育种技术领域，更具体涉及用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物及应用。本发明提供的分子标记引物为Geo15‑115‑F:CGAAGAAACAGGAAAGAGAATCG和Geo15‑115‑R:GGCACGGTGTACACCAGGAG，利用该引物，可准确区分鉴定猕猴桃磨山系列雄性品种，还可区分除磨山系列雄性品种之外的其他品种，具备鉴定的普适性，适合大规模推广。

技术领域

本发明属于分子生物学及遗传育种技术领域，更具体涉及用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物及应用。

背景技术

近年来，我国猕猴桃产业稳步扩增，截至2016年全国栽培面积达220万亩，产量260万吨，产值超过200亿元。猕猴桃属于雌雄异株类型，即雌花中花粉败育，而雄花中子房发育不完全且胚珠败育。因此，在猕猴桃育种及商业果园栽培中，通常需选择优良雄株的花粉，进行异花授粉，才能实现猕猴桃结实。

近年来，中国科学院武汉植物园选育的‘磨山’雄性系列猕猴桃品种(即‘磨山雄1号’、‘磨山雄2号’、‘磨山雄3号’、‘磨山4号’和‘磨山雄5号’)，具有花期覆盖广、花量大、花粉萌发率高等特点，已成为多个优异猕猴桃品种的配套授粉雄株。例如‘磨山雄2号’猕猴桃不仅能给早花期和中花期的中华猕猴桃授粉，而且能促进红心系列猕猴桃果实品质改善，增加内果皮红色积累。目前，对‘磨山’系列品种的鉴定仅通过树势、叶片形态、花期和花形态等传统手段，难免受到环境和其他人为因素的影响。对‘磨山’系列品种鉴定的不确定性，给猕猴桃育种工作造成较大的困难，且混杂或者错误的雄性品种也必定会影响果实生产和果品质量。

分子标记技术的应用为品种鉴定提供了客观和准确的手段。分子标记技术通过检测生物个体在基因组上产生的变异，从而对不同个体进行区分，是继形态标记和生化标记之后，发展的一种较为理想的遗传标记。在植物种质资源鉴定及育种中，对分子标记的应用已日趋成熟。RAPD分子标记多态频率高、特异性强，广泛用于小麦、水稻和玉米等禾本科植物的种质鉴定。SSR分子标记等位变异高且稳定性好，已应用于大豆、苹果和葡萄等资源鉴定研究。SNP分子标记多态性高且分布广，适合进行品种鉴定和分类研究。在猕猴桃中，已开发SNP分子标记对猕猴桃糖、酸以及果实大小等重要农艺性状进行分子辅助育种。然而，对猕猴桃雄性系列品种的分子标记鉴定研究尚未开展。

开发适用于雄性猕猴桃品种的分子鉴定标记，能有针对性的选配杂交父本，有利于提高对猕猴桃的育种效率，提升猕猴桃产业经济效益。

发明内容

本发明的目的在于利用分子标记技术，提供一种用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物，所述的分子标记命名为Geo15-115，针对其设计的引物为Geo15-115-F:CGAAGAAACAGGAAAGAGAATCG和Geo15-115-R:GGCACGGTGTACACCAGGAG。

本发明的另一个目的在于提供了用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物在猕猴桃育种中的应用。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

用于猕猴桃磨山系列雄性品种鉴定的分子标记引物的获得：申请人从猕猴桃基因组序列网站(http://bioinfo.bti.cornell.edu/kiwi)下载‘红阳’猕猴桃全基因序列。在全基因组范围内挖掘不同重复单元SSR位点，比对基因结构注释结果，选择在基因区间的SSR位点设计扩增引物。利用设计合成的引物，对猕猴桃‘磨山’系列品种进行PCR扩增，筛选得到分子标记Geo15-115，针对其设计的引物为Geo15-115-F:CGAAGAAACAGGAAAGAGAATCG和Geo15-115-R:GGCACGGTGTACACCAGGAG。