[发明专利]一种提高籼稻及籼粳交花药培养效率的培养基及应用

说明书

本发明公开了一种提高籼稻及籼粳交花药培养效率的培养基及应用，属于作物育种技术领域。具体涉及：设计出一种新的水稻花药培养的培养基，是指对比M₈和N₆培养基后花药在经过测试的组织培养基上直接分化成苗，并可直接移栽。利用该培养基能够简化花药培养程序，提高培养效率，为拓展花培技术在水稻育种领域的应用增加了可能，从而创建了一个高效的花药培养的系统，解决水稻花药组织培养过程中水稻基因型的狭窄和组织培养的低效率、以及产苗率难以满足育种群体需要等问题，同时该技术能够适应生产上大规模获得水稻组培苗的轻简模式，降低了劳动强度，减少生产成本。

技术领域

本发明属于水稻作物育种技术领域，具体涉及一种提高籼稻及籼粳交花药培养效率的培养基及应用。

背景技术

我国从20世纪70年代初开始进行水稻花药组织培养的应用研究，并于1975年首先育成花培品种并应用于生产。花药组织培养已成为水稻生物技术育种中较为成熟的途径，利用该技术选育的水稻新品种有常规粳稻、常规籼稻及三系杂交水稻的恢复系和两系杂交水稻的光温敏不育系等，其类型涉及到当前水稻育种中所有领域。

花药培养技术虽然具有缩短育种周期、提高选择效率、快速创新种质等诸多优势，但植物组织培养存在很强的物种依赖性和基因型特异性。目前水稻花药培养效率尤其是籼稻，平均出愈率只有0.5％左右，一般不超过5％，绿苗率大多在20％以下，有些材料甚至不能诱导出愈伤组织或者难以得到花粉植株。目前江苏丘陵地区镇江市农业科学研究所余波等人提出了一种提高粳稻花药培养效率的方法(专利公开号：CN103461141B)，因此为了简化培养程序，提高培养效率，本实验室提出一种新的水稻花药组织培养基配方，是指花药在一种改良的组织培养基上直接分化成苗，并且可以直接移栽大田的培养方法。

发明内容

技术问题

目前水稻花培育种已经成为水稻育种比较成熟的手段，但是依旧存在许多理论和技术问题，比如出愈率、分化率以及绿苗得率并不完全呈正相关，尤其是籼稻产苗率难以满足育种群体的需要。正是由于水稻品种间性状有明显差异,离体花药对于培养基的反应差异很大,导致花药诱导频率较低，白化苗偏多等现象。为了解决目前技术中存在的问题和不足，本发明探索出一种新的培养基配方，以期能够提高水稻花药培养的效率，拓展花培技术在水稻育种领域的应用。

技术方案

一种提高籼稻及籼粳交花药培养效率的培养基，其特征在于，包括大量元素、Fe盐、微量元素、激素类，所有试剂均用ddH₂O配制，其中：

(1)大量元素其组分以及浓度(20×)如下：KNO₃ 57171.70mg/L、MgSO₄·7H₂O3737.40mg/L、KH₂PO₄ 8040.20mg/L、(NH₄)₂SO₄9353.50mg/L、CaCl₂·2H₂O 4210.50mg/L；

(2)Fe盐其组分以及浓度(20×)如下：FeSO₄·7H₂O 2785.00mg/L、Na₂·EDTA3725.00mg/L；