[发明专利]一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法

权利要求书

1.一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：

一、将产丁醇细菌接种到已灭菌的液体厌氧发酵培养基中，在恒温条件下振荡培养至对数期；

二、待步骤一中细菌生长达到对数期后，将丁酸溶液添加到步骤一发酵体系中，使发酵体系中的丁酸溶液浓度达到 0.6~1.5g/L；

三、在添加完丁酸溶液后，将缓冲剂间歇添加到步骤二中所建立的发酵体系中，恒温条件下继续振荡培养，得到以丁醇为主的发酵液， 即完成所述的提高厌氧细菌产丁醇活性；

所述的缓冲剂添加总量为 0.03~0.04mol/L，间歇添加的条件为每间隔 24h 添加一次，共添加 2 次，每次添加后振荡均匀；步骤一中所述的产丁醇细菌为丙酮丁醇梭菌（Clostridium acetobutylicum）ATCC824；所述的缓冲剂为碳酸钙。

2. 根据权利要求 1 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于步骤一中所述的液体厌氧发酵培养基含有浓度为 40~60g/L 的碳源、1~3g/L 酵母提取物、0.1~0.3g/L 硫酸镁、0.01~0.02g/L 硫酸锰、0.01~0.02g/L 硫酸亚铁、0.01~0.02g/L 氯化钠、0.001~0.002g/L维生素B1、0.3~0.7g/L半胱氨酸、0.001~0.002g/L对氨基苯甲酸、0.0001g/L生物素和 0.1~0.2g/L刃天青。

3. 根据权利要求 2 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于步骤一中所述的液体厌氧发酵培养基含有浓度为40~60g/L的碳源、2g/L酵母提取物、0.2g/L硫酸镁、0.01g/L 硫酸锰、0.01g/L 硫酸亚铁、 0.01g/L 氯化钠、0.001g/L 维生素 B1、0.5g/L半胱氨酸、0.001g/L对氨基苯甲酸、0.0001g/L生物素和 0.1g/L刃天青。

4. 根据权利要求1 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于所述的液体厌氧发酵培养基中的碳源为葡萄糖、淀粉或木质纤维素物质水解糖化液。

5. 根据权利要求 1 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于步骤一中接种的发酵产丁醇细菌的接种比例为发酵体积的 1~2%。

6. 根据权利要求1 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于步骤三中恒温条件为：温度为 34~37℃，转速为 150~180r/min 的条件下振荡培养，共培养 60~100小时。

7. 根据权利要求1 所述的一种提高厌氧细菌产丁醇活性的方法，其特征在于发酵体系中的丁酸溶液浓度达到 1.0~1.5g/L。