[发明专利]一种圣地红景天组培繁殖方法

权利要求书

1.一种圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，其包括如下步骤：

步骤一、外植体的获取及灭菌处理：提前13-15天对红景天植株喷洒多菌灵，从红景天植株上取下无病虫害的红景天叶片，洗衣粉溶液浸泡20分钟，清水冲洗2小时；在超净台中对上述红景天叶片进行外植体灭菌处理；

步骤二、不定芽诱导：将步骤一获取的已消毒灭菌的红景天叶片在无菌环境下进行切成小片，并接种至已灭菌的诱导红景天愈伤组织的培养基上培养，获得长有不定芽的红景天愈伤组织；

步骤三、生根培养：将长至1cm的不定芽从愈伤组织上切下，并接种至生根培养基上进行生根培养，培养45-60天后，获得红景天无菌苗；

步骤四、驯化移栽：将生根后的无菌苗移至室外大棚内，炼苗7天后，将无菌苗从所述生根培养基分离，并栽种至混合基质中；

所述步骤二中的所述培养基配方为：MS+BA0.5-1.0mg/L+NAA0.05-0.1mg/L+圣地红景天叶片汁液1g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，所述培养基的pH值为5.8-6.0；

所述圣地红景天叶片汁液的制备方法为鲜物研磨或榨汁。

2.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤一中的所述多菌灵为稀释800倍液，所述步骤一中的所述外植体灭菌处理的具体步骤为：首先在75％酒精中浸泡20-30秒，再用无菌水冲洗2-3次，然后放入摩尔浓度为0.1％的升汞中浸泡8-13分钟，再用无菌水冲洗5-7次。

3.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤二，将已消毒灭菌的红景天叶片在无菌环境下切成面积为0.8-1.2cm²的小片，并在所述小片上划出2-3道伤口。

4.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤二的所述不定芽诱导的培养环境为：首先进行暗培养，暗培养时间为40-50天，然后进行光照培养，光照强度1800-2000Lx，光照时间为12d/h；所述培养环境的温度为23-25℃。

5.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤三中的所述生根培养基的配方为：1/2MS+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+AC0-3g/L，所述生根培养基的pH值为5.8-6.0。

6.根据权利要求5所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤三的生根培养的培养环境为：光照强度1800-2000Lx，光照时间为12d/h；所述培养环境的温度为23-25℃。

7.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤四中，将无菌苗从所述生根培养基分离后，先将其根部的培养基质清洗干净，然后用稀释600倍的甲基托布津浸泡其根部30秒，最后才将所述无菌苗栽种至所述混合基质中。

8.根据权利要求1所述的圣地红景天组培繁殖方法，其特征在于，所述混合基质为重量比为2:1:1的泥炭、珍珠岩、蛭石形成的混合基质。