[发明专利]一种检测单细胞EGFR基因突变的引物组合及其应用有效
| 申请号： | 201710748543.5 | 申请日： | 2017-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN107475392B | 公开（公告）日： | 2020-05-19 |
| 发明（设计）人： | 岳春燕;李仁;马艳;朱光宇;胡志远 | 申请（专利权）人： | 国家纳米科学中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王莹;王璐 |
| 地址： | 100190 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 单细胞 egfr 基因突变 引物 组合 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测单细胞EGFR基因突变的试剂，其特征在于，包括针对EGFR基因第18、19、20和21号外显子的特异性引物对，如SEQ ID NO.1～8所示；其中，第18、19、20和21号外显子的特异性引物按照1.5:1:1.5:1的比例混合。
2.一种检测单细胞EGFR基因突变的试剂盒，其特征在于，包括针对EGFR基因第18、19、20和21号外显子的特异性引物对，如SEQ ID NO.1～8所示；其中，第18、19、20和21号外显子的特异性引物按照1.5:1:1.5:1的比例混合。
3.一种非疾病诊断或治疗目的的单细胞多重PCR扩增方法，其特征在于，PCR反应体系为10μL：
含有检测单细胞EGFR基因突变的引物组合的引物混合液0.5μL；
所述检测单细胞EGFR基因突变的引物组合包括针对EGFR基因第18、19、20和21号外显子的特异性引物对，如SEQ ID NO.1～8所示；
所述引物混合液的制备方法为：将10μM的第18、19、20和21号外显子的特异性引物按照1.5:1:1.5:1的比例混合成原液后，稀释10倍，即得。
4.根据权利要求3所述的扩增方法，其特征在于，PCR反应条件为：95℃3min；95℃30s，57℃45s，72℃45s，15个循环；72℃8min。
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