[发明专利]复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用，属于生物医用材料技术领域。

背景技术

随着人们生活水平的提高，动脉粥样硬化，血管栓塞以及动脉瘤等心血管疾病对人类的健康造成了极大的威胁。因上述疾病等原因导致人体自身血管无法正常供血时，则需采用人工血管进行外科更换手术。人体内血管口径由2mm至30mm不等，在这其中，小口径(直径<6mm)极易发生内膜增生以及血栓形成，进而导致小口径血管远期通畅率低。目前，医院手术中使用的人造血管材料多为ePTFE，PU等材料，但这些材料本身不具备良好的抗凝血性能，需在材料表面进行抗凝血涂层。

现有常用的抗凝血涂层有肝素涂层，其涂层方法各异，不同的方法所制备的肝素涂层材料性能也有所差异。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复合肝素生物抗凝涂层液及制备方法与应用。

为实现上述目的，本发明所提供的复合肝素生物抗凝涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素。

本发明的复合肝素生物抗凝涂层液中起效的部分为交联状态的联氨基姜黄素-肝素。所述联氨基姜黄素通过其上的氨基与肝素交联。

本发明还提供了一种上述复合肝素生物抗凝涂层液的制备方法，步骤如下：

将联氨基姜黄素溶解于乙醇溶液中，配置成姜黄素醇溶液，向姜黄素醇溶液中加入MES缓冲液，再加入肝素，然后再加入EDC和NHS交联剂，搅拌1～2h，使联氨基姜黄素中的氨基与肝素充分反应，将反应完成的溶液放入透析袋透析24～72h，透析完成后，得到复合肝素生物抗凝涂层液。

上述方案中，所述联氨基姜黄素和肝素的添加重量比为1～10:40。该比例是联安姜黄素和肝素的较佳反应比值，本发明中的有效成分为交联状态的联氨基姜黄素-肝素，所以只要能够生成它的联氨基姜黄素和肝素任意配比添加量都是可以使用的。

需要说明的是，上述涂层液在单独作为涂层液使用时效果并不理想，它需要和生物活性蛋白联用发挥功效。如胶原蛋白、丝素蛋白、粘连蛋白。在研究过程中，发明人发现在一定的配比下，联氨基姜黄素-肝素和丝素蛋白联用有较好的效果。

因此，本发明还提供了一种联氨基姜黄素-肝素及丝素蛋白的生物抗凝涂层液，所述生物抗凝涂层液中包含有交联状态的联氨基姜黄素-肝素，还包括丝素蛋白；所述生物抗凝涂层液中所述联氨基姜黄素-肝素在的浓度为0.5～5％wt，所述丝素蛋白的浓度为5～15％wt，且联氨基姜黄素-肝素与丝素蛋白的浓度比值为1:1～10。

本发明利用姜黄素具有的抗组织增生、抗炎症反应等特性，将它和肝素结合在一起，以克服植入性医疗器械(如人造血管)在植入人体之后易发生的问题(如凝血作用会导致血小板聚集引起血栓导致血管再次狭窄，而组织过度增生和炎性反应也会引起排异反应而导致血管狭窄，最终使人造血管等植入器械的生物相容性变差而植入失败)。

本发明的有益效果：现代药理研究表明姜黄素类成分具有抗凝血、抗组织增生、抗炎性反应等多种药理作用，本发明将姜黄素与肝素两者连用不仅可以增强肝素涂层的抗凝血功能，还能起到单纯用肝素或蛋白等涂层所无法达到的抗组织增生、抗炎性反应等功能，对于人造血管、血管支架、血管补片等植入器械在人体内减少血栓形成，降低术后并发症，提高产品的使用寿命至关重要。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步的详细描述。

需要说明的是，下述例子中使用的人造血管(ePTFE)在涂层之前均经过前处理，以提高其对涂层的结合力，使生物涂层能够稳定且有效的发挥抗凝血等功能。

人造血管(ePTFE)基材，前处理过程如下：

第一层

将ePTFE人造血管浸没于异丙醇(IPA)5～10mins，然后用镊子取出再浸泡于4％聚乙烯亚胺(PEI)和IPA混合液(体积比PEI:IPA＝1:1)15～30mins后，取出浸泡的人造血管，用去离子水浸泡冲洗人造血管。待冲洗完后，将人造血管放置于0.05％戊二醛溶液中15～20mins进行交联，待反应完成后将人造血管再次浸泡在0.5％PEI溶液中15～30mins，用去离子水对构造后的人造血管进行浸泡冲洗。冲洗完成后，将人造血管浸泡在氰基硼氢化钠溶液中反应15～30mins，反应完成后用去离子水浸泡冲洗。

第二层