[发明专利]一种短密木霉、菌剂、方法及在降解咪唑乙烟酸的应用有效
申请号: | 201710753890.7 | 申请日: | 2017-08-29 |
公开(公告)号: | CN107541468B | 公开(公告)日: | 2019-12-27 |
发明(设计)人: | 董爱荣;毛庆莲;李志国;霍璐阳 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A62D3/02;A62D101/04;A62D101/26;A62D101/28;C12R1/885 |
代理公司: | 61223 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 150040 *** | 国省代码: | 黑龙;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 咪唑乙烟酸 木霉 保藏 木霉菌剂 降解率 降解 微生物技术领域 微生物菌种保藏 液体培养基 管理中心 土壤 菌剂 应用 | ||
本发明属于微生物技术领域,具体公开了一种短密木霉、菌剂、方法及在降解咪唑乙烟酸的应用。所述短密木霉在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.14123,保藏日期为2017年05月10日。本发明的短密木霉、短密木霉菌剂可以有效的降解土壤中的咪唑乙烟酸,短密木霉对液体培养基中咪唑乙烟酸的降解率达65.3%,短密木霉菌剂对含500mg/kg咪唑乙烟酸土壤中咪唑乙烟酸的降解率达78.38%。
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种短密木霉、菌剂、方法及在降解咪唑乙烟酸的应用。
背景技术
随着化学农药尤其是除草剂的大面积广泛的使用,土壤污染、水污染和后茬作物生长受到抑制等问题接踵而来。咪唑乙烟酸就是其中的典型之一。咪唑乙烟酸除草剂虽具有高效广谱的优点,但其残留半衰期较长,不易分解,长期使用会造成后茬作物药害,并对作物的轮作造成很多困扰。
咪唑乙烟酸被称为豆田除草剂的“四大天王”之一,具其他除草剂不可替代的独特魅力。自九十年代,我国开始进口咪唑乙烟酸并在黑龙江省大面积推广使用,并且消耗量量持续增涨。特别是相关国产除草剂的上市,由于其低廉的价格,良好的除草效果,故咪唑乙烟酸除草剂的推广使用迅速席卷东北地区,成为内蒙古地区与黑龙江省大豆田的主要除草剂品种。
咪唑乙烟酸一般在土壤中不易发生化学、物理方面的降解作用,所以其残留的去除主要还是依靠微生物的降解作用。目前,已经有丙酸杆菌属、海球菌属、节细菌属、芽孢杆菌属、酸单胞杆菌属、产碱菌属、无色杆菌属等细菌被发现对咪唑乙烟酸有降解作用。
通过分离、筛选能够高效降解咪唑乙烟酸残留物质的微生物,来加速土壤中残留农药的降解,从而实现污染土壤的微生物修复,对维持生态平衡、保护环境和提高大豆田经济价值具有重要意义。
发明内容
本发明提供的一种短密木霉、菌剂、方法及在降解咪唑乙烟酸的应用,短密木霉对咪唑乙烟酸具有良好的降解效果,具有良好的应用前景。
本发明的第一个目的是提供一种短密木霉,所述短密木霉在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.14123,保藏日期为2017年05月10日,分类命名为短密木霉(Trichoderma brevicompactum)。
本发明的第二个目的是提供一种应用上述短密木霉制备而成的短密木霉菌剂,由短密木霉菌分生孢子粉、腐植酸、蛭石按照10:1-5:85-90的质量比例混合后,加水至含水量为10-15%,制得短密木霉菌剂。
本发明的第三个目的是提供一种上述短密木霉菌剂的制备方法,具体按照以下步骤制备:
(1)一级菌种的制备:在MEA平板上接种短密木霉原始菌种,放在28℃培养箱中培养,待短密木霉孢子长满后,得到一级菌种;
(2)二级菌种的制备:接种一级菌种到装有MEA液体培养基的三角瓶中28℃,160r/min,震荡培养7天;
(3)固体发酵:制备固体培养基,固体培养基的成分及质量比例为:玉米渣:稻壳:麦数=3:20:15,加水至固体培养基的含水量为50%;接种二级菌种,接种量为每100g固体培养基接种7g二级菌种;在28℃温室中发酵培养7天;
(4)取培养后的固体培养基,放入30℃的干燥箱烘干;最后粉碎机磨碎,制成短密木霉菌分生孢子粉,向短密木霉菌分生孢子粉中加入相当于分生孢子粉重量8倍的无菌水,混匀,制成孢子液,备用;
(5)将蛭石进行粉碎,控制其细度为40-60目,加水调节含水量为8-12%,向蛭石中加入腐植酸,调配均匀后得到基质混合物,将(4)中的孢子液均匀喷洒到基质混合物上,混匀,其中,短密木霉菌分生孢子粉、腐植酸、蛭石的重量配比为10:1-5:85-90,最后30℃烘干至含水量为10-15%,得到短密木霉菌剂。
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