[发明专利]一种GSK‑3β抑制剂在治疗动脉粥样硬化的药物上的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物基因工程技术领域，具体涉及一种GSK-3β抑制剂在治疗动脉粥样硬化的药物上的应用。

背景技术

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是指在动脉及其分支的动脉壁内膜及内膜下有脂质沉着(主要是胆固醇及胆固醇酯)，同时伴有中层平滑肌细胞移行至内膜下增殖，使内膜增厚，形成黄色或灰黄色状如粥样物质的斑块。目前，AS是严重威胁人类健康的疾病，心、脑、肾是主要的AS靶器官，可导致心肌梗死、缺血性心肌病，脑卒中和慢性肾病，最终导致多器官功能衰竭和死亡。在西方发达国家其年死亡数可以占到总死亡数的1/3左右，占心脏病死亡数的50％-75％，据近年来WHO统计冠心病是目前世界上最常死亡原因，超过所有肿瘤的总和，列死因的首位。而在我国本病不如欧美多见，但近30年来其发病率和死亡率正迅速增高，已严重威胁到我国国民生活水平和质量。

N-(4-Methoxybenzy)-N′-(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)urea(N-(4-甲氧苄基)-N′)-(5-硝基-1,3噻唑-2-烃))即Ar-a014418，其化学结构式为：

Ar-a014418是一种1,3-硫氮杂茂类化合物，常温下为白色固体，微溶于水，在二甲基亚砜中的溶解度为5mg/ml，目前常在实验室内作为糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的特异性抑制剂应用于凋亡信号转导通路的研究，还在动物模型上作抑郁症治疗的研究工作。

GSK-3β在动脉粥样硬化发病中的作用及分子机制尚未明确，目前国内外文献亦未见GSK-3β调控SMC特异性转录因子Myocardin对动脉粥样硬化发生发展的作用的报道。本发明实验研究发现，抑制Myocardin上游的GSK-3β基因的活性能下调Myocardin并有效地阻断其下游SM22、Caponin基因的转录与表达，可影响平滑肌细胞的增殖和分化功能，进而达到治疗动脉粥样硬化的目的。

发明内容

为了达到上述目的，本发明提供了一种GSK-3β抑制剂在治疗动脉粥样硬化的药物上的应用。

本法明是通过以下技术方案实现的。

一种GSK-3β抑制剂在治疗动脉粥样硬化的药物上的应用，其特征在于，所述治疗方法为通过GSK-3β抑制剂抑制Myocardin上游的GSK-3β基因的活性，进而治疗动脉粥样硬化。

优选的，所述治疗方法为药物干预、基因调控中的一种或一种以上。

优选的，所述药物干预方法为将GSK-3β抑制剂Ar-a014418与其他辅药按常规制药工艺制成试剂、片剂、胶囊剂、乳剂中的一种或一种以上。

优选的，所述试剂按Ar-a014418与注射用水以1g:1000毫升的比例与其他辅药均匀混合制得。

优选的，所述基因调控方法为通过转染重组技术重组GSK-3β质粒，以达到调控GSK-3β活性的目的，检测比较使用Ar-a014418进行调控的作用，进而达到确定使用Ar-a014418治疗动脉粥样硬化的目的。

优选的，所述GSK-3β抑制剂包括AR-A、LiCl中的一种或一种以上。

优选的，所述GSK-3β抑制剂为Ar-a014418。

优选的，所述GSK-3β抑制剂Ar-a014418分子式为：

本发明的有益效果是：本发明通过T-Rex系统成功构建高灵敏度可调控的稳定表达Myocardin的平滑肌细胞系，可清楚灵敏的反映目的基因的转录水平和蛋白表达的细微变化，能更好地研究目的基因的功能特性。同时，本发明通过大量实验结果表明GSK-3β抑制剂AR-A能下调Myocardin的mRNA与蛋白表达水平，削弱Doxycycline对Myocardin的诱导表达作用，有效地阻断Myocardin下游平滑肌标志基因SM22，Caponin的转录与表达，并且有效削弱Doxycycline诱导Myocardin表达所致的SM22、Caponin的mPNA与蛋白表达水平的增高，达到治疗动脉粥样硬化的目的；为进一步探讨动脉粥样硬化的治疗进展道路提供理论依据，进而为动脉粥样硬化药物干预与基因治疗提供新策略。

附图说明

图1为构建高灵敏度可调控的稳定表达Myocardin的血管平滑肌实验细胞系的示意图。

图2为体内实验qPCR实验结果示意图。

图3为建立动脉粥样硬化动物模型的示意图。

图4为体外实验qPCR实验结果示意图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本法明进一步作详细的说明。