[发明专利]固定化漆酶及其制备方法

权利要求书

1.一种固定化漆酶，其特征在于，所述固定化漆酶是以介孔化膨润土为载体，所述介孔化膨润土上固定有漆酶；所述介孔化膨润土是以膨润土为原料经酸碱刻蚀后制备得到；所述介孔化膨润土包括硅氧化物、铝氧化物、镁氧化物；所述介孔化膨润土为层状粘土矿物；所述介孔化膨润土的粒径为1μm～20μm；所述介孔化膨润土的平均孔径为2nm～10nm；所述介孔化膨润土的比表面积为244.622m²/g；所述介孔化膨润土的最可几孔径孔为4.770nm；

所述介孔化膨润土的制备方法包括以下步骤：

（1）将膨润土与碱溶液混合，在转速为5r/min～60r/min、温度为50℃～120℃进行碱刻蚀，洗涤至中性，在温度为80℃～120℃下烘干，得到碱刻蚀膨润土；

（2）将碱刻蚀膨润土与酸溶液混合，在转速为5r/min～60r/min、温度为50℃～100℃进行酸刻蚀，洗涤至中性，在温度为80℃～120℃下烘干，研磨，过100目～200目筛，得到介孔化膨润土。

2.根据权利要求1所述的固定化漆酶，其特征在于，所述固定化漆酶中所述漆酶的固定量为16.073mg/g；所述漆酶的尺寸为6.5 nm×5.5 nm×4.5nm。

3.一种如权利要求1或2所述的固定化漆酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将介孔化膨润土与漆酶溶液混合进行振荡吸附，离心，得到固定化漆酶。

4.根据权利要求3中所述的制备方法，其特征在于，所述介孔化膨润土与所述漆酶溶液的质量体积比为400mg∶100mL。

5.根据权利要求4中所述的制备方法，其特征在于，所述漆酶溶液由漆酶粉末溶于pH值为3～7的缓冲溶液中制备得到；所述漆酶溶液的初始浓度为0.1 mg/mL～4mg/mL。

6.根据权利要求5中所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液为柠檬酸缓冲液或磷酸盐缓冲溶液；所述磷酸盐缓冲溶液由磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液混合后制备得到；所述柠檬酸缓冲液由柠檬酸溶液和柠檬酸钠溶液混合后配制得到。

7.根据权利要求3～6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述介孔化膨润土的制备方法包括以下步骤：

S1、将膨润土与碱溶液混合，在转速为5r/min～60r/min、温度为50℃～120℃进行碱刻蚀，洗涤至中性，在温度为80℃～120℃下烘干，得到碱刻蚀膨润土；

S2、将碱刻蚀膨润土与酸溶液混合，在转速为5r/min～60r/min、温度为50℃～100℃进行酸刻蚀，洗涤至中性，在温度为80℃～120℃下烘干，研磨，过100目～200目筛，得到介孔化膨润土。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中：所述膨润土与碱溶液的质量体积比为4g～10g∶100mL；所述碱溶液为NaOH溶液；所述碱溶液的浓度为5M～10M；所述碱刻蚀的时间为5h～12h；所述烘干的时间为5h～12h；

和/或，所述步骤S2中：所述碱刻蚀膨润土与酸溶液的质量体积比为4g～10g∶100mL；所述酸溶液为HCl溶液；所述酸溶液的浓度为2M～8M；所述酸刻蚀的时间为5h～10h；所述烘干的时间为5h～12h。

9.根据权利要求3～6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述振荡吸附的转速为150r/min～300r/min；所述振荡吸附的温度为20℃～40℃；所述振荡吸附的时间为5min～120min；

和/或，所述离心的转速为4000r/min～10000r/min；所述离心的时间为5min～15min。