[发明专利]GIPC2蛋白在制备直肠癌术后预后评估试剂盒中的应用、直肠癌预后评估试剂盒及方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及GIPC2蛋白在制备直肠癌术后预后评估试剂盒中的应用、直肠癌预后评估试剂盒及方法。

背景技术

直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，占胃肠道肿瘤的第二位，好发部位为直肠及直肠与乙状结肠交界处，占60％，发病多在40岁以后，男女患病比例为2：1。

直肠癌在早期缺少症状，病人无明显异常改变。当肿块达1～2cm时，由于肿瘤的侵蚀，肠粘膜遭受到肿块的异物性刺激，分泌物增多，因此在排便时也有少量的粘液排出，多数在大便的前端或于粪便的外面附着。随着肿瘤的增大，分泌粘液也增加，有时随着排气或突然咳嗽腹内压增加，可有粘液从肛门流出。当肿瘤增大，形成溃疡或有坏死合并感染时，便会出现明显的直肠刺激症状，出现排便次数和粪便性质的改变。排便次数增加，每天2～3次，呈粘液便，稀便，粘液血便。常被误诊为“肠炎”“痢疾”“溃疡性结肠炎”等。但是，直肠癌腹泻症状并不象结肠炎那样，来势急，好转快；也不象痢疾那样典型的出现里急后重症状。直肠癌的直肠刺激症状是既缓慢又逐渐进展，在合并感染时刺激症状明显，一经对症处理也可以暂时好转，但是经过较长时间的治疗仍有粘液血便者，应引起足够的重视。

直肠癌的病因尚未完全清楚。直肠癌的早期发现、早期诊断，是提高疗效的关键。直肠癌的发生发展及预后与癌基因的激活和抑癌基因功能失活密切关联，是多因素诱导，多基因参与的复杂病理过程。近年来，直肠癌早期复发转移的分子机制是该领域的热门课题，深入阐明该分子机制，并在其特异性环节中导入靶向性治疗措施，有望很大幅度提高直肠癌术后总体治疗效果。因此，探寻切实有效的直肠癌直肠切除术后早期复发相关预警分子标志，阐明其与直肠癌早期复发转移的关系，这对提高直肠癌术后治疗效果、评估直肠癌早期复发风险、判断预后和个体化治疗有着至关重要的意义。

GIPC2(GIPC PDZ domain containing family member 2)是一种包含PDZ结构域的接头蛋白。目前发现GIPC2在胃癌中上调，但是在白血病和肾癌中则是下调，显示其可能与肿瘤的发生相关。

直肠癌做为对人类健康威胁最大的肿瘤之一，至今其发生的分子机制仍不清楚，对其的治疗也缺少特异性的分子靶点，而GIPC2做为十分重要的肿瘤癌基因，目前尚无文献报道GIPC2蛋白与判断直肠癌预后或直肠癌转移相关。而本发明研究发现在直肠癌中的GIPC2表达与病人术后预后存在显著的关系，暗示GIPC2可作为直肠癌的术后预后的有效预警蛋白。

发明内容

本发明目的在于提供GIPC2蛋白在制备直肠癌术后预后评估试剂盒中的应用，并提供用于直肠癌术后预后评估的试剂盒及方法。

本发明经过广泛而深入的研究，首次发现，采用免疫组化方法检测GIPC2蛋白在直肠癌组织中的相对表达量，能够判断直肠癌患者出现直肠癌复发转移的风险。基于GIPC2蛋白表达量与直肠癌复发转移的相关性，以GIPC2蛋白作为预后标记物对其表达量进行检测可以用于指导直肠癌的预后判断。

因此，本发明提供了GIPC2蛋白在制备直肠癌术后预后评估试剂盒中的应用，该应用是以GIPC2蛋白作为分子标记，利用GIPC2单克隆抗体或多克隆抗体，结合免疫组化实验试剂，检测GIPC2蛋白在直肠癌组织中的相对表达量。

本发明还提供了所述应用中用于直肠癌术后预后评估的试剂盒，该试剂盒包括：人源GIPC2单克隆抗体或GIPC2多克隆抗体、免疫组化实验试剂。所述免疫组化实验试剂为本领域免疫组化实验中的常用试剂。

发明人研究发现，GIPC2在复发转移直肠癌组织中表达低于未复发转移直肠癌组织，可以推测GIPC2在直肠癌术后复发转移发挥重要作用。查阅国内外文献，GIPC2与直肠癌的发生以及复发转移的相关研究少，在本研究中，GIPC2在直肠癌组织中的表达下调，而在癌旁和正常直肠组织中则表达上调，且与未复发转移组相比，GIPC2在复发转移组中表达也下调，表明GIPC2可能作为抑制因子参与直肠癌发生发展过程。通过Kaplan-Meier生存曲线分析，GIPC2表达程度与直肠癌患者的预后有关，GIPC2低表达的患者预后不良(P<0.05)。

综上所述，GIPC2在直肠癌组织中低表达，GIPC2的低表达与直肠癌患者术后复发转移有关。GIPC2可以作为直肠癌预后的一个重要候选分子标记物。

优选的，所述人源GIPC2多克隆抗体由序列为SEQ ID NO.1所示的GIPC2蛋白免疫兔子获得，可自行制备，也可采用市购商品。