[发明专利]一种硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法

权利要求书

1.一种硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于具体步骤如下：将硼酸修饰的纳米复合材料以超纯水为溶剂配置成10 mg/mL的材料分散液；将该材料分散液与目标糖肽溶液加入50 mM碳酸氢铵缓冲液中，混合并在37°C下震荡富集45分钟；离心分离出纳米复合材料，用50 mM碳酸氢铵缓冲液充分洗涤，随后用50%乙腈/1%三氟乙酸洗脱；洗脱液用质谱分析；

其中，所述的硼酸修饰的纳米复合材料为硼酸修饰的金属有机骨架纳米复合材料。

2.根据权利要求1所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于所述质谱分析为MALDI-TOF MS质谱分析，具体步骤为：取1 μL洗脱液点到MALDI-TOF MS进样靶板上，干燥后再点加1 μL浓度为30 mg/mL的2,5-二羟基苯甲酸溶液于该液滴上，形成基质结晶，干燥后进行MALDI-TOF MS质谱分析。

3.根据权利要求1所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于所述质谱分析为LC-MSMS质谱分析，具体步骤为：将洗脱液冻干后分散在10 μL A相中，4 μL分散液根据线性梯度在110分钟内从2% B相到40% B相进行LC-MSMS质谱分析，其中，A相为水/0.1%甲酸，B相为乙腈/0.1%甲酸。

4.根据权利要求1所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于所述的硼酸修饰的金属有机骨架纳米复合材料的制备步骤如下：

将FeCl₃•6H₂O、柠檬酸钠、乙酸铵溶于乙二醇中，磁力搅拌至澄清，超声后转移至反应釜，200℃下反应16小时，取出反应釜，冷却过夜，倒出磁球，用去离子水及乙醇充分洗涤，在50℃下真空干燥得到四氧化三铁磁球；

配置聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯亚胺的水溶液，将步骤（1）所得的四氧化三铁磁球分散于该水溶液中，室温下搅拌反应6-20小时，制得聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯亚胺包覆的磁球，磁铁分离产物，用二甲基甲酰胺和水充分洗涤，在50℃下真空干燥；

在二甲基甲酰胺和乙腈中分散步骤（2）所得产物，超声至充分分散；加入九水合硝酸铁、对苯二硼酸、对苯二甲酸，搅拌均匀，120℃下加热搅拌60分钟；

在步骤（3）所得体系中加入九水合硝酸铁、对苯二硼酸、对苯二甲酸，搅拌均匀，120-150℃下加热搅拌30分钟，每隔30分钟重复3次，磁铁分离产物，用二甲基甲酰胺、去离子水和无水乙醇充分洗涤，在50℃下真空干燥即得所述的硼酸修饰的金属有机骨架纳米复合材料。

5.根据权利要求4所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（1）中FeCl₃•6H₂O和乙二醇的质量对应体积比为（0.8-1.5）g：（40-80）ml。

6.根据权利要求5所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（1）中FeCl₃•6H₂O和乙二醇的质量对应体积比为1.15g：60ml。

7.根据权利要求4所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（1）中FeCl₃•6H₂O、柠檬酸钠、乙酸铵的质量比是：1.15：0.45：3.30。

8.根据权利要求4所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（2）中四氧化三铁磁球、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯亚胺的质量比为1:10:4。

9.根据权利要求4所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（3）中聚乙烯吡咯烷酮和聚乙烯亚胺包覆的磁球和九水合硝酸铁、对苯二硼酸、对苯二甲酸的质量比为1：16：8：8。

10.根据权利要求4所述的硼酸修饰的纳米复合材料的糖肽富集与质谱检测方法，其特征在于步骤（4）中九水合硝酸铁、对苯二硼酸、对苯二甲酸的质量比为160 mg：80 mg：80mg，反应温度为120℃，反应时间为30分钟，重复3次。