[发明专利]用于鉴定桉树无性系的STR引物、PCR试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201710761216.3 | 申请日： | 2017-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN107354222B | 公开（公告）日： | 2020-10-30 |
| 发明（设计）人： | 周长品;李昌荣;李发根;翁启杰;陈升侃;王莉;甘四明 | 申请（专利权）人： | 中国林业科学研究院热带林业研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510520 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴定 桉树 无性 str 引物 pcr 试剂盒 方法 | ||
1.用于鉴定桉树无性系的PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒的反应体系包括2xType-it Multiplex PCR Master Mix 5μL，RNase-Free Water 1μL，Primers 2μL，30ng/μL待测桉树无性系的DNA 2μL；
其中Primers包括以下8对引物：
EUCeSSR0475引物对：其正向引物如SEQ ID NO.1所示，其反向引物如SEQ ID NO.2所示；
EUCeSSR0204引物对：其正向引物如SEQ ID NO.3所示，其反向引物如SEQ ID NO.4所示；
EUCeSSR419引物对：其正向引物如SEQ ID NO.5所示，其反向引物如SEQ ID NO.6所示；
EUCeSSR1128引物对：其正向引物如SEQ ID NO.7所示，其反向引物如SEQ ID NO.8所示；
EUCeSSR298引物对：其正向引物如SEQ ID NO.9所示，其反向引物如SEQ ID NO.10所示；
EUCeSSR0176引物对：其正向引物如SEQ ID NO.11所示，其反向引物如SEQ ID NO.12所示；
EUCeSSR181引物对：其正向引物如SEQ ID NO.13所示，其反向引物如SEQ ID NO.14所示；
EUCeSSR304引物对：其正向引物如SEQ ID NO.15所示，其反向引物如SEQ ID NO.16所示；
各引物对在反应体系中的终浓度为：
EUCeSSR0475引物对的正向、反向引物各为0.17μM，EUCeSSR0204引物对的正向、反向引物各为0.05μM，EUCeSSR419引物对的正向、反向引物各为0.15μM，EUCeSSR1128引物对的正向、反向引物各为0.33μM，EUCeSSR298引物对的正向、反向引物各为0.19μM，EUCeSSR0176引物对的正向、反向引物各为0.06μM，EUCeSSR181引物对的正向、反向引物各为0.17μM，EUCeSSR304引物对的正向、反向引物各为0.87μM；
所述的Primers包含的每个引物对中，用荧光物质标记在正向引物的5'端，EUCeSSR0475引物对、EUCeSSR0204引物对、EUCeSSR419引物对、EUCeSSR1128引物对、EUCeSSR298引物对、EUCeSSR0176引物对、EUCeSSR181引物对、EUCeSSR304引物对标记的荧光物质依次分别是ROX、6-FAM、TAMRA、ROX、TAMRA、6-FAM、HEX、ROX。
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