[发明专利]基于活性染料的病理组织快速染色方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种基于活性染料的病理组织快速染色方法。

背景技术

活体组织病理诊断是外科的第一诊断，是金标准，医生可以根据标本的检测结果作出正确的诊断，制定疾病下一步的治疗计划。病理报告的准确性在相当程度上对疾病的诊断和治疗起决定性作用，而正确处理病理标本不仅能给病理诊断及临床诊断提供有效的保证，而且也维护了患者身心，杜绝了因不当标本处理带来的纠纷。

病理标本制备是将取材后的病理组织依次经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封固，因为未加染色的任何组织在镜下只能辨认细胞和胞核的轮廓，看不清楚其他任何结构，因此，染色是标本制备的重要步骤。染色的目的就是将组织浸入染色剂内，经过一定的时间，将组织或细胞及其他异常成分染上不同深浅的颜色，便于在光学显微镜下进行观察，研发一种安全、无毒、高效、适用性强的染色方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于活性染料的病理组织快速染色方法，用以实现安全、无毒、高效的病理组织染色。

本发明提供了一种基于活性染料的病理组织快速染色方法，具体包括如下步骤：

(1)首先配制一定pH值、一定浓度的磷酸盐缓冲液，然后将活性染料添加到所述磷酸盐缓冲液中配制染色液；

(2)将步骤(1)所得染色液预热至一定温度后加入病理组织切片；

(3)将步骤(2)所得产物脱水、透明、固封。

进一步的，所述磷酸盐缓冲液的pH值为6.0-8.0，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01-0.03mol/L，所述染色液的浓度为1％(w/v)。

进一步的，所述步骤(2)中染色液预热的温度为60-80℃。

采用上述本发明技术方案的有益效果是：

本发明是利用活性染料替代酸性染料对组织切片进行染色，将病理组织切片利用不同活性染料进行染色，可以获得染色稳固、色彩各异的组织切片，安全、无毒、高效、色谱广、色泽鲜艳、性能优异、适用性强，其色相和性能满足市场需求，采用经济的染色工艺和简单的染色操作获得高水平的各项坚牢性能。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

本实施例提供了一种基于活性染料的病理组织快速染色方法，具体包括如下步骤：

(1)首先配制pH值为7.0、浓度为0.02mol/L的磷酸盐缓冲液，然后将活性染料添加到该磷酸盐缓冲液中配制染色液，该染色液的浓度为1％(w/v)；

(2)将步骤(1)所得染色液预热至70℃后加入病理组织切片；

(3)将步骤(2)所得产物脱水、透明、固封。

本发明的原理为：活性染料分子包括母体染料和活性基两个主要组成部分，活性染料上的活性基团能与纤维素纤维上的羟基、蛋白质纤维上的氨基、聚酰胺纤维上的氨基和羧羟基发生共价键结合，二者之间形成共价键，成为整体，使耐洗和耐摩擦牢度提高。

活性染料的反应特点、反应性主要取决于活性基，不同活性基取决于不同的反应性。在含有单活性基的活性染料中，X型活性染料的反应性最强，稳定性较低，易与水解，上染速率较快，能在室温和较弱的碱性条件下反应；K型活性染料反应性最差，稳定性较高，所需上染温度较高，必须在较高温度、强碱性条件下才能反应；KN型活性染料的性能和染色条件介于X型和K型之间。在含有双活性基的活性染料中，B型活性染料的染色性能稳定，溶解度高，适合低浴比染色；配伍性强；染色重现性好；渗透性和匀染性好，对染色工艺条件的变化有相当强的适应性；低亲和力，能轻易洗除浮色；各项湿处理牢度优异，固色率高，染色后色光鲜艳纯正；适用于浸染；可在60-80度下对纤维素纤维染色，在碱性物质的作用下，其混合型双活性基团能与纤维束分子形成共价键结合而对其实现固着。

本发明的有益效果为利用活性染料替代酸性染料对组织切片进行染色，将病理组织切片利用不同活性染料进行染色，可以获得染色稳固、色彩各异的组织切片，安全、无毒、高效、色谱广、色泽鲜艳、性能优异、适用性强，其色相和性能满足市场需求，采用经济的染色工艺和简单的染色操作获得高水平的各项坚牢性能。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。