[发明专利]一种枯草芽孢杆菌冻干粉的制备方法有效
申请号: | 201710768507.5 | 申请日: | 2017-08-31 |
公开(公告)号: | CN107446857B | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 杨文革;张玉皓;胡永红;周翼;曹洋;洪厚胜;章泳;樊世敏;马小平;沈飞;孙红军;刘邮洲 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/125 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;袁正英 |
地址: | 211816 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 干粉 制备 方法 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌冻干粉的制备方法,其具体步骤如下:
(1)将枯草芽孢杆菌菌悬液均匀分散于冻干保护剂溶液中形成枯草芽孢杆菌悬浮液,分装于西林瓶中,冰水浴中预冷,投入液氮中预冻;其中所述的冻干保护剂溶液中冻干保护剂为海藻糖、甘露醇和硫代硫酸钠,其中海藻糖的浓度为0.15~0.5mol/L,甘露醇的浓度为0.05~0.4mol/L,硫代硫酸钠的浓度为0.05~0.5mol/L;溶剂为磷酸缓冲盐溶液,pH为7.2-7.4;冰水浴中预冷的温度为0℃~4℃,冰水浴的预冷时间为5~30min;液氮中预冻的时间为10~16h;枯草芽孢杆菌菌悬液的浓度为4-8×108cfu/mL;枯草芽孢杆菌与冻干保护剂溶液体积比为1~4:1;
(2)将步骤(1)中预冷、预冻的枯草芽孢杆菌悬浮液转移至冷冻干燥机中,进行真空干燥,得到枯草芽孢杆菌冻干粉;其中真空干燥条件为:干燥压力10~45Pa,隔板温度-40~-10℃,冷阱温度-212~-76℃,干燥时间45~120min。
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