[发明专利]一种胎牛血清替代物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种胎牛血清替代物，由去除蛋白的成牛血清和营养组分组成，其特征在于：各营养组分在去除蛋白的成牛血清中的终含量为：

2·2H2O]]>	154.4 mg/L±2%
4·5H2O]]>	0.0013 mg/L±2%
1% 柠檬酸亚铁	2.46 ml/L (0.246% v/v) ±2%
氢化可的松	0.5 mg/L±2%
4·7H2O]]>	0.417 mg/L±2%
KCl	311.8 mg/L±2%
2·6H2O]]>	61 mg/L±2%
4·7H2O]]>	99.88 mg/L±2%
NaCl	6.9 g/L±2%
2PO4·2H2O]]>	70.68 mg/L±2%
2HPO4·12H2O]]>	71.02 mg/L±2%
葡萄糖	1.25g/L±2%
丙酮酸钠	55mg/L±2%
GABA储存液	2 ml /L±2%
LiCl储存液	2 ml±2%
哌啶酸浓缩液	129.7ul /L±2%
Stock A储存液	20 ml /L±2%
2SeO3 储存液]]>	0.2 ml/L±2%

其中，去除蛋白的成牛血清的制备方法如下：

1)取健壮成牛血液，加入抗凝剂，静置后无菌条件下取黄色血浆，离心去除沉淀，取上清；

2)在步骤1）得到的上清中加入终浓度为20mM的CaCl₂，37℃水浴2h；

3)将步骤2）水浴后的上清冷冻，之后放置融化，去除蛋白沉淀并收集上清；

4)向步骤3）的上清中加入NaCl进行盐析，分离上清，离心去除沉淀，收集上清；

5)脱盐，将NaCl质量浓度调到0.7%，得到去除蛋白的成牛血清。