[发明专利]一种树蝴蝶精制多糖及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于食品的技术领域，具体涉及一种树蝴蝶精制多糖及其制备方法与应用。

背景技术

多糖是除了蛋白质和核酸以外的一类重要的生物高分子化合物。现代药理研究表明多糖具有多种生理活性，包括抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、降血脂、延缓衰老、增强免疫功能等。而大多数高等植物来源的多糖均为无不良反应的物质，不会对机体产生较大的副作用，因此，从植物中分离的多糖在生物医学上引起极大关注。目前已对百余种植物多糖进行了活性相关的研究报道。研究表明植物多糖可通过与免疫细胞表面的多种受体结合、激活不同的信号通路来调控动物机体内的免疫系统，包括：刺激巨噬细胞、T/B淋巴细胞、自然杀伤细胞的分泌或增殖；调节细胞因子的释放；促进抗体的分泌；激活补体系统等。

对这些活性物质的作用机制也在不断发展，其中多糖对非特异性诱导的免疫机制更受到人们的重视。植物多糖是最理想的免疫候选药物。

树蝴蝶为子囊地衣类(Ascolichenes)茶渍目(Lecanorales)牛皮叶科(Stictaceae)肺衣属(Lobaria Hoffm)植物光肺衣、裂芽肺衣和网肺衣的干燥叶状地衣体，具有良好的药理作用，具有健脾利水、祛风止痒等功效。对树蝴蝶多糖的研究报道几乎没有。大多数天然活性多糖是无毒副作用的天然绿色产品。随着研究的不断深入，天然多糖越来越成为食品、保健品、医药等领域的研究热点。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种树蝴蝶精制多糖的制备方法。

本发明的另一目的在于提供由上述制备方法制备得到的树蝴蝶精制多糖，使其多糖获得率较高。

本发明的再一目的在于提供上述树蝴蝶精制多糖的应用。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种树蝴蝶精制多糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将树蝴蝶在蒸馏水中进行回流提取，采用大孔吸附树脂对提取液进行脱色处理，再采用沉淀剂进行沉淀，离心，收集沉淀物并干燥，得到树蝴蝶粗多糖；

(2)将树蝴蝶粗多糖配制成多糖溶液，转入装有经过预处理的DEAE-52树脂的层析柱中，用蒸馏水洗脱，收集洗脱液，苯酚-硫酸法跟踪检测洗脱液，测定490nm下的吸光度，绘制洗脱曲线，同一吸收峰内的洗脱液合并；然后旋蒸浓缩，真空冷冻干燥，得到精制多糖，其中，蒸馏水洗脱得到的精制多糖记为LKY-I。

步骤(2)中所述的DEAE-52树脂预处理的方法为：将DEAE-52树脂用水4～40℃浸泡12～24h；再用0.5mol/L的盐酸溶液浸泡0.5～2h；0.5mol/L的NaOH溶液浸泡0.5～2h，过滤，水洗至中性，得到经过预处理的DEAE-52树脂；

步骤(2)中所述旋蒸浓缩的温度为40～60℃。

步骤(2)中所述层析柱为Z型层析柱。

步骤(2)中所述蒸馏水进行洗脱时流速为5～10s/滴。

步骤(2)中所述装有经过预处理的DEAE-52树脂的层析柱是通过以下方法装填而成：将经过预处理的DEAE-52树脂于40～60℃旋转蒸发除气泡后转入Z型层析柱中，用恒流泵泵送蒸馏水以使填料装柱均匀，平衡后流速5～10s/滴。

步骤(1)中所述树蝴蝶粗多糖的具体制备方法为：

(1-1)将树蝴蝶粉碎过筛，得到树蝴蝶粗粉；向树蝴蝶粗粉中加入蒸馏水进行超声处理，加热回流提取，抽滤，并将滤液浓缩，得到浓缩的树蝴蝶粗多糖溶液；

(1-2)将树蝴蝶粗多糖溶液和经过预处理的大孔吸附树脂混合，脱色处理，过滤出多糖溶液，并用水反复洗出树脂中吸附的多糖，将脱色后的多糖溶液合并，减压浓缩，得到浓缩糖液；

(1-3)向浓缩糖液中加入沉淀剂进行沉淀，离心，收集沉淀物并干燥，得到树蝴蝶粗多糖。

步骤(1-1)中所述超声时间为10～20min；超声功率为60～400W；

步骤(1)和(1-1)所述加热回流的温度为75～100℃；步骤(1)和(1-1)所述加热回流提取的时间为2～4h；步骤(1)和(1-1)中加热回流提取的次数为2～4次；

步骤(1)和(1-1)中所述树蝴蝶粗粉与蒸馏水的质量比为1:20～1:30；热水回流提取多次时，树蝴蝶粗粉与每一次使用的蒸馏水的质量比为1:20～1:30。

步骤(1-1)中所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为40～60℃；步骤(1-2)中所述减压浓缩的温度为40～60℃。

步骤(1)和(1-2)所述脱色处理的条件为于40～60℃水浴2～4h；