[发明专利]苯酚类化合物作为甲型强心苷显色剂的用途及甲型强心苷含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及甲型强心苷含量测定方法技术领域，尤其是涉及苯酚类化合物作为甲型强心苷显色剂的用途及甲型强心苷含量的测定方法。

背景技术

强心苷是存在于植物中具有强心作用的甾体类化合物，由强心苷元和糖缩合而成，强心苷根据取代基团的不同分为甲型强心苷和乙型强心苷两类，其中尤以甲型强心苷最为常见，如洋地黄毒苷和乌本苷等。甲型强心苷不仅具有广泛的药理作用，而且具有强心、抗肿瘤、利尿、抗癌等活性，使得越来越多的学者开始关注甲型强心苷。但是甲型强心苷含量的测定一直是甲型强心苷应用研究方面的难点，《中国药典》2015版中缺乏对测定甲型强心苷的方法的记载，而目前文献报道也没有关于甲型强心苷含量的测定方法。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种苯酚类化合物作为甲型强心苷显色剂的用途，以缓解甲型强心苷含量的测定一直是甲型强心苷应用研究方面的难点的技术问题。

本发明提供了苯酚类化合物作为甲型强心苷显色剂的用途，所述苯酚类化合物的通式为：

其中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅均独立地选自氢、卤素、羧基、硝基、C_1-6烷基、C_3-5链烯基、C_3-5炔基、酰基、醚基和酯基中的一种，且R₁、R₂、R₃、R₄和R₅不同时为氢，其中酰基的通式为COR₆，醚基的通式为OR₇，酯基的通式为COOR₈，所述R₆、R₇和R₈均独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或C_1-6烷氧酯基。

进一步的，所述苯酚类化合物选自3,5-二硝基苯酚、间硝基苯酚、2,6-二硝基苯酚、对甲基苯酚、对氯苯酚、对溴苯酚、对乙酰基苯酚、对硝基苯酚、3,5-二溴苯酚、3,5-二甲基苯酚、2,6-二甲基苯酚、3,5-二氟苯酚、间氟苯酚、对叔丁基苯酚、对乙基苯酚、对甲氧基苯酚和2-硝基苯酚中的一种，优选为3,5-二硝基苯酚或3,5-二溴苯酚。

本发明的目的之二在于提供一种甲型强心苷含量的测定方法，以缓解甲型强心苷含量的测定一直是甲型强心苷应用研究方面的难点的技术问题。

本发明提供的甲型强心苷含量的测定方法，包括如下步骤：

将甲型强心苷溶解于醇溶剂中，配置成甲型强心苷的醇溶液，再与苯酚类化合物混合，进行显色反应，测定显色溶液在485nm-500nm处的吸光度，得到甲型强心苷的含量。

进一步的，所述甲型强心苷含量的测定方法，包括如下步骤：

(a)配置不同浓度的甲型强心苷的醇溶液，使之分别与苯酚类化合物进行显色反应，测定不同浓度的甲型强心苷的醇溶液显色后的吸光度，得到标准曲线及其回归方程；

(b)将待测甲型强心苷溶解于醇溶剂中，配置成甲型强心苷醇溶液，再与苯酚类化合物进行显色反应，测定吸光度；

(c)将测定的吸光度代入回归方程，得到待测甲型强心苷的醇溶液中甲型强心苷的含量。

进一步的，先将苯酚类化合物溶解于水，配置成甲型强心苷显色剂溶液，再与甲型强心苷的醇溶液混合，进行显色反应。

进一步的，甲型强心苷的醇溶液中甲型强心苷的浓度为16-32mg/L，甲型强心苷显色剂溶液中，苯酚类化合物的摩尔浓度为0.01-0.1mol/L。

进一步的，甲型强心苷醇溶液与甲型强心苷显色剂溶液的体积比为(2-4)：1，优选为3：1。

进一步的，进行显色反应的时间为5-40min，优选为10-30min，更优选为20min。

进一步的，所述醇溶剂为低碳醇，所述低碳醇优选为甲醇、乙醇或丙醇，更优选为乙醇。

进一步的，所述甲型强心苷提取于植物，其提取方法包括如下步骤：先将植物进行粉碎，再采用乙醇作为提取液，进行超声提取，即得到甲型强心苷的乙醇溶液。