[发明专利]基于Taqman探针的慢性肾脏病相关基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种基于Taqman探针的慢性肾脏病相关基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒，其特征在于，包括检测VIM基因的上下游引物及探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO 1-3所示；检测BCL2基因的上下游引物及探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO 4-6所示；检测PODLX基因的上下游引物及探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO 7-9所示；检测TGFB1基因的上下游引物及探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO 10-12所示；检测B2M内参基因的上下游引物及探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO 13-15所示。

2.根据权利要求1所述的基于Taqman探针的慢性肾脏病相关基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒，其特征在于，所述PCR试剂盒还包括PCR酶混合液和MasterMix。

3.根据权利要求1-2任一所述的基于Taqman探针的慢性肾脏病基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒，其特征在于，所述探针5’端标记的荧光报告基团是FAM，3’端连接淬灭基团。

4.根据权利要求3所述的基于Taqman探针的慢性肾脏病相关基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒，其特征在于，所述淬灭基团为BHQ 1非荧光淬灭基团。

5.一种权利要求1所述的基于Taqman探针的慢性肾脏病相关基因检测荧光定量PCR一步法试剂盒在制备分别检测基因VIM、BCL2、PODLX和TGFB1试剂盒中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述检测基因时PCR反应体系为10ul，包括提取的样本RNA 1ul，上下游引物和探针混合液3.5ul，PCR酶混合液0.5ul，MasterMix 5ul。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述检测基因时荧光定量PCR反应条件为：42℃ 5min；95 ℃ 10min；95℃ 20s；60℃ 退火/延伸45s，循环45次；40℃冷却30 s。