[发明专利]一种产四甲基吡嗪的地衣芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种产四甲基吡嗪的地衣芽孢杆菌，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌的分类命名为地衣芽孢杆菌GJBL055(Bacillus licheniformis GJBL055)，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2017年4月24日，保藏编号为CCTCC NO：M 2017204，保藏地址为中国武汉武汉大学。

2.一种权利要求1所述的产四甲基吡嗪的地衣芽孢杆菌的应用，其特征在于：是将产四甲基吡嗪的地衣芽孢杆菌应用到中温架式大曲培养工艺中，生产高四甲基吡嗪含量的大曲，具体包括如下步骤：

步骤1：功能菌培养液的制备

用接种环挑取1-2环保存于斜面的地衣芽孢杆菌GJBL055菌株于300-400mL液体培养基中，37℃下120rpm摇床培养24h，获得一级种子液；将一级种子液按10％的接种量接种于发酵罐中，37℃下80rpm培养24h，获得二级种子液；再将二级种子液按10％的接种量接种于发酵罐中，37℃下80rpm培养24h，获得三级种子液，即为功能菌培养液；

步骤2：功能菌培养液的加入

将步骤1获得的功能菌培养液加入制曲专用贮水箱中，混匀后加入制曲物料全麦粉并搅拌均匀，通过踩制使物料充分混合并控制含水率为36-37％，获得曲坯，每块曲坯的厚度控制在6.9-7.1cm；

步骤3：功能性架式大曲的排布

将曲坯呈直线形摆制在曲架上，每个曲架放置五层曲坯，每个曲架间距5-8cm，每个曲架摆放32-34块曲坯；

步骤4：架式大曲的培养

经步骤3排布好的架式大曲的培养包括以下六个阶段：卧曲收汗期、发酵期、低温培菌期、缓升期、高温增香期以及回火排潮期，得到高四甲基吡嗪含量的大曲；包括如下步骤：

4a、卧曲收汗期：进曲之前在曲房内均匀地撒水使曲房内湿度≥80％，卧完曲后控制曲坯品温与曲房温度保持相同，卧曲收汗期控制曲房温度≥15℃，上限为环境温度，曲房湿度≥80％；卧曲收汗期的时间为1.5-2.5天；

4b、发酵期：卧曲收汗期结束后进入发酵期，发酵期为5-7天，发酵期曲坯品温的升温速度控制在4-6℃/天；当上层曲坯的品温达到43-46℃，在该温度下保持12-20小时后进行第一次翻曲；

4c、低温培菌期：低温培菌期的时间为6-7天，低温培菌期的温度控制在28-35℃，并且每天的温度波动范围≤3℃；在低温培菌期的第6天或第7天，曲坯品温达到35-38℃时，进行第二次翻曲；

4d、缓升期：低温培菌期结束后进入缓升期，缓升期曲坯品温的升温速率控制在3-5℃/天，直至曲坯品温升温至46-50℃并保持1-2天，缓升期内曲房湿度控制在60-80％；当曲坯成熟度达到80-85％，缓升期结束，开始拾摞子，进入高温增香期；

4e、高温增香期：拾摞子时撤掉曲架，将曲坯摆放成直线型或者品字形或者直线型与品字形混合摆放；拾摞子的当天，10、11月份曲坯品温控制在45-50℃，3-9月份曲坯品温控制在47-52℃，并保持72小时以上；

4f、回火排潮期：高温增香期结束后，曲坯品温自然从50℃以上自然降低至室温，曲坯含水率≤15％，即得高四甲基吡嗪含量的大曲。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

步骤1中，所述液体培养基按质量浓度构成如下：葡萄糖1wt％，酵母浸膏1wt％，氯化钠0.5wt％，溶剂为水。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

步骤2中，功能菌培养液的添加量为每房进曲总质量的0.5％。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

发酵期和低温培菌期中所述翻曲是指进行下层与上层曲坯、中部与外部曲坯位置的交换。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

在发酵期内，当曲坯表面发粘，并且曲房内微有甜酸味的时候，应进行排潮，排潮过程中控制曲房内湿度≥80％，温度下降≤5℃。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

发酵期的温度控制≤55℃。