[发明专利]一种阿维链霉菌合成培养基及其发酵液的制备方法

权利要求书

1.一种阿维链霉菌合成培养基，其特征在于，按1L体积计算，是由如下重量的原料组成：

一水麦芽糖8~25g， 无水葡萄糖3~14g， 苏氨酸0.8~2.5g，

七水硫酸镁0.3~0.5g， 七水硫酸亚铁0.005~0.015g， 三水磷酸氢二钾0.15~0.45g，

一水硫酸锰0.01~0.02g，氯化钠0.3~0.6g， 3-(N-吗啉)丙磺酸4~6g，

剩余为水。

2.根据权利要求1所述的阿维链霉菌合成培养基，其特征在于：所述阿维链霉菌合成培养基的pH=7.2~7.5。

3.利用如权利要求1所述合成培养基制备阿维链霉菌发酵液的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、种子培养

种子培养基配方为：玉米淀粉25~35g/L、黄豆饼粉6~10g/L、花生饼粉8~12g/L、酵母粉3~5g/L、淀粉酶0.02~0.04g/L、氯化钴0.002~0.004g/L；玉米淀粉经糊化水解后加入其余组分并煮沸12~18min，室温冷却后用8~12层医用纱布过滤除渣，pH=6.86~6.90；斜面挖块接种于25~30℃下200~260rpm摇床中培养35~45h；然后在离心管中25~30℃下3500~4500rpm离心4~6min，弃上清并用等体积无菌生理盐水清洗离心2~4次，等体积无菌生理盐水悬浮；

S2、配制阿维链霉菌合成培养基

合成培养基配方为：一水麦芽糖8~25g/L、无水葡萄糖3~14g/L、苏氨酸0.8~2.5g/L、七水硫酸镁0.3~0.5g/L、七水硫酸亚铁0.005~0.015g/L、三水磷酸氢二钾0.15~0.45g/L、一水硫酸锰0.01~0.02g/L、氯化钠0.3~0.6g/L、3-(N-吗啉)丙磺酸4~6g/L；

S3、液体发酵培养

按3%~10%接种量将液体种子转接于所述合成培养基中，在25~30℃、200~260rpm摇床中连续培养7~9天或在转速140~160rpm且溶氧不低于30%的发酵罐下连续培养7~9天，即可获得含有阿维菌素B1a物质的阿维链霉菌发酵液。

4.根据权利要求3所述的制备阿维链霉菌发酵液的方法，其特征在于：

步骤S1中，种子培养基配方为：玉米淀粉30g/L、黄豆饼粉8g/L、花生饼粉10g/L、酵母粉4g/L、淀粉酶0.03g/L、氯化钴0.003g/L；玉米淀粉经糊化水解后加入其余组分并煮沸15min，室温冷却后用10层医用纱布过滤除渣，pH=6.86~6.90；斜面挖块接种于28℃下240rpm摇床中培养40h；然后在离心管中28℃下3500~4500rpm离心5min，弃上清并用等体积无菌生理盐水清洗离心3次，等体积无菌生理盐水悬浮。

5.根据权利要求3所述的制备阿维链霉菌发酵液的方法，其特征在于：

步骤S3中，按5%~8%接种量将液体种子转接于所述合成培养基中，在28℃、240rpm摇床中连续培养7~9天或在转速150rpm且溶氧不低于30%的发酵罐下连续培养7~9天。