[发明专利]一种同时测定11种类黄酮的高效液相色谱检测方法及检测水果中的类黄酮含量的方法

权利要求书

1.一种同时测定11种类黄酮的高效液相色谱检测方法，所述11种类黄酮为飞燕草素葡萄糖苷、飞燕草色素芸香糖苷、芍药色素葡萄糖苷、矢车菊素芸香糖苷、矢车菊素葡萄糖苷、芦丁、山柰酚、槲皮素、杨梅黄酮、异鼠李素以及芹菜素，包括以下步骤：

(1)配制包含所述11种类黄酮标准样品的待测溶液；

(2)将所述步骤(1)得到的待测溶液进行高效液相色谱分析，得到待测样品的色谱图，所述高效液相色谱分析的色谱条件为：

分析柱：C18柱；

流动相：水相A:0.3wt％磷酸水溶液；有机相B：乙腈；

流速：1mL/min；

洗脱方式：梯度洗脱，0min，A:B＝95:5，20min，A:B＝85:15，30min，A:B＝75:25，40min，A:B＝50:50，48min，A:B＝95:5；

检测温度：40℃；

进样体积：10μL；

检测时间：50min；所述检测时间为(0,20)min时，检测波长为510nm，所述检测时间为[20,50]min时，检测波长为360nm；

检测器：G1314F VWD检测器；

(3)根据所述待测样品的色谱图与预定的标准谱图进行对比，得到待测样品中类黄酮的种类。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测溶液进行高效液相色谱分析前还包括用0.22μm的有机滤膜对待测溶液进行过滤，得到进样溶液。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述待测溶液中11种类黄酮的浓度独立地为2.5～500.0μg/mL。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述C18柱为InfinityLab Poroshell120 EC-C18，所述C-18柱的规格为4.6×150mm。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中配制待测溶液使用的溶剂为甲醇-盐酸混合溶液，所述甲醇-盐酸混合溶液中甲醇与盐酸的体积比为98:2，所述盐酸的质量分数为30～36％。

6.一种水果中类黄酮的检测方法，包括以下步骤：

(1)水果鲜样破碎后第一避光醇提，固液分离得到第一滤液和第一滤渣；

(2)将所述步骤(1)得到的第一滤渣反复进行避光醇提，将滤液合并得到第二滤液；

(3)将所述第一滤液和第二滤液混合后依次进行稀释、离心分离和有机滤膜过滤，得到待测液，所述有机滤膜的孔径为0.22μm；

(4)将步骤(3)得到的待测液进行高效液相色谱分析，用外标法以标准方程计算得到水果中类黄酮的含量，所述标准方程是以每种类黄酮的质量浓度为自变量、峰面积为因变量的方程；

所述高效液相色谱分析的色谱条件为权利要求1所述的同时测定11种类黄酮的高效液相色谱检测方法中的色谱条件。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中第一避光醇提使用的浸提剂为甲醇-盐酸混合溶液，所述甲醇-盐酸混合溶液中甲醇与盐酸的体积比为99:1，所述盐酸的质量分数为30～36％。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中水果鲜样的质量与浸提剂的体积比为5g:25～35mL。

9.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中标准方程的线性范围独立地为5～500μg/mL。