[发明专利]一种蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂及其保存、检测方法

说明书

本发明提供了一种蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂及其保存、检测方法，所述蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂由以下重量份的原料组成：填充剂85～95份，显色剂0.5～1.5份，磷酸盐2.5～7份，羟甲基糠醛氧化酶0.5～4.5份和辣根过氧化物酶0.5～4份。本发明操作简单，试剂安全，便于携带，操作过程简单、高效，结果直观可见，显色在可见光区，肉眼可见颜色变化；检测灵敏度高，使用分光光度计检测限可达0.15mg/L；检测方法回收率高、重现性好，检测结果与国家标准高效液相色谱法相符性高，平均回收率达98.5％，相对标准偏差(n＝10)为3.86％，说明本发明测定回收率高、重现性好。

技术领域

本发明涉及食品安全快速检测技术领域，尤其涉及一种灵敏度高、操作简单的蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂及其保存、检测方法。

背景技术

蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的天然甜物质。蜂蜜中含有与人体血清浓度相近的多种无机盐和维生素、铁、钙、铜、锰、钾、磷等多种有机酸及有益人体健康的微量元素，还含有糖类和多种氨基酸，具有极高的保健作用和营养价值，深受消费者的青睐。近年来，国内和国际市场对蜂蜜的需求量不断扩大，然而蜂蜜的产量难以满足市场的需求，且由于蜜源的不同，蜂蜜的种类繁多，成分复杂，使得蜂蜜品质的检测技术存在很大局限。羟甲基糠醛含量是蜂蜜质量的重要指标之一，蜂蜜长时间存放羟甲基糠醛含量会上升，蜂蜜掺糖浆(例如甘蔗糖浆、玉米糖浆)会使产品中羟甲基糠醛含量成倍增加，因为糖浆在制备过程中加热而使葡萄糖或果糖氧化生成羟甲基糠醛，因此，羟甲基糠醛含量也可用来指示产品是否掺糖浆。我国《食品安全国家标准-蜂蜜》(GB14963-2011)规定，羟甲基糠醛含量≤40mg/kg；美国FDA也规定，普通天然蜂蜜中羟甲基糠醛含量≤40mg/kg，来源于热带地区常温贮藏的天然蜂蜜中羟甲基糠醛含量≤80mg/kg。

关于羟甲基糠醛的检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法和硫代巴比妥酸比色法等等。高效液相色谱法和气相色谱法由于要使用大型仪器，不适合于现场快速检测和基层实验室检测。紫外分光光度法，由于蜂蜜中有紫外吸收物质多而使测定干扰多，同时也不适合于现场快速检测。硫代巴比妥酸比色法需要用到强酸条件，试剂稳定性较差，反应时间较长，蜂蜜中其它糖类有一定干扰等缺点，从而限制其在蜂蜜中羟甲基糠醛的快速检测中的应用。

中国专利文献上公开了“一种蜂蜜中羟甲基糠醛的快速检测方法”，其公告号为CN104359901A，该发明采用混合比例为5:1的甲苯胺溶液和巴比妥酸溶液的混合溶液作检测液，将蜂蜜样品加入其中显色后借助比色卡对照检测。该发明试剂稳定性较差，干扰因素多，检测操作过程繁琐，依赖于实验室，不便于携带，不利于大规模推广使用。

发明内容

本发明为了克服传统蜂蜜中羟甲基糠醛检测效率低、误差大的问题，提供了一种灵敏度高、抗干扰能力强的蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂。

本发明又提供了一种操作简单、存储效果好的蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂的保存方法。

本发明还提供了一种测定回收率高、重现性好的蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂的检测方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂，所述蜂蜜中羟甲基糠醛快速检测的预制试剂由以下重量份的原料组成：填充剂85～95份，显色剂0.5～1.5份，磷酸盐2.5～7份，羟甲基糠醛氧化酶0.5～4.5份和辣根过氧化物酶0.5～4份。