[发明专利]竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法

说明书

本发明公开了一种竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法，该方法包括步骤(1)对照品溶液制备；步骤(2)供试品溶液制备和步骤(3)UFLC‑MS/MS检测。本发明根据竹叶椒中活性成分和杂质成分的结构性质特点，通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，洗脱程序、流速，柱温和色谱柱等分析条件，经多次实验验证表明。本发明以盐酸小檗碱为内标化合物，可同时测定6种生物碱的含量。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确的评价竹叶椒药材的质量，对控制药材的质量和保证临床疗效具有重要意义。

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，特别涉及同时测定竹叶椒药材中六种生物碱类成分的方法。

背景技术

竹叶椒(Zanthoxylum armatumDC.)系芸香科花椒属植物，分布于华东、中南、西南及陕西、甘肃、台湾等地，生长于海拔2300米以下的山坡疏林、灌木丛中及路旁，产量丰富，具有镇痛、抗炎、增强细胞免疫及抗菌作用、降血糖作用、保肝作用、抑制血小板聚集活性等药理活性。其主要化学成分有生物碱、木脂素、挥发油、香豆素、微量元素等，其中生物碱为其主要活性成分，且已有研究表明isodecaline及dictamine具有显著止痛作用。目前竹叶椒质量检测方法有化学滴定法测定总生物碱的方法和高效液相法对白藓碱和茵芋碱的定量分析方法。竹叶椒含有多种生物碱活性成分，如Isodecaline、6–acetonyldihydrochelerythrine、N-Methylanhydrotetrahydroberberrubine A、escholidine perchlorate、别隐品碱和白鲜碱。目前尚未有同时测定竹叶椒药材中六种生物碱类成分方法的报道。

因此，为了更加全面、客观、准确的控制竹叶椒药材的质量，很有必要在现有技术的基础之上，设计研发一种检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价竹叶椒药材质量的检测方法。

发明内容：

发明目的：本发明的目的就是针对竹叶椒药材检测现状，为有效的控制竹叶椒药材质量，提供一种同时测定竹叶椒药材中六种生物碱类成分的方法，有助于对竹叶椒药材质量控制及保证临床疗效。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种竹叶椒药材中生物碱类成分的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

分别精密称取Isodecaline、6–acetonyldihydrochelerythrine、N-Methylanhydrotetrahydroberberrubine A、escholidine perchlorate、别隐品碱，白鲜碱对照品和盐酸小檗碱为内标化合物，精确吸取乙醇或甲醇，超声溶解，摇匀，制得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

竹叶椒药材供试品溶液的制备：精密称取一定质量竹叶椒药材，置于锥形瓶中，加入提取溶剂，超声提取，放冷，称重，加入相同提取溶剂补重，摇匀，离心，取上清液，即得竹叶椒药材供试品溶液；

(3)UFLC-MS/MS检测：

吸取步骤(1)对照品溶液，依次稀释成6个不同浓度的对照品溶液，分别注入UFLC-MS/MS系统进行分析制定标准曲线；然后取步骤(2)供试品溶液注入UFLC-MS/MS系统，根据标准曲线计算供试品溶液中生物碱含量；