[发明专利]一种酶制剂的饲用活性评估方法

说明书

本发明提供了一种酶制剂的饲用活性评估方法，包括：使用添加有待评估酶制剂的饲料饲喂动物，同时设置对照组；取饲喂动物粪便，通过16S rDNA测序方法分别得出动物肠道菌群状况；对比对照组，评估动物肠道菌群状况是否具备正向调节的饲用活性。本发明还提供了一种酶制剂饲用活性的综合评估方法，结合动物肠道菌群状况以及饲喂动物性状指标进行综合的评估。本发明提供的评估方法从动物肠道菌群方面出发，依托宏基因组技术，建立了一种全新的酶制剂饲用效果评估方法，填补了目前酶制剂功效评估方面的空白，并为其他饲料添加剂的评估方式开拓了新的思路。

技术领域

本发明涉及饲料及饲料添加剂领域，具体涉及一种酶制剂的饲用活性评估方法。

背景技术

随着畜牧业的不断发展，饲用酶制剂的应用也越发成熟。不仅单酶品种繁多，各种特色复合酶也层出不穷。虽然酶制剂的作用效果得到了广泛认可，但我国对其相关活性指标却没有统一的规定。

目前，在评价酶制剂质量的时候，往往过于依赖检测酶制剂酶活的方法，但是用酶活来评估酶制剂在动物生产中的实际效果是不科学的，酶活高低并不能用来预测产品的相对性能。因为，第一，测定酶活的条件和饲料复合酶在动物体内发挥作用的条件不同，高酶活不代表高饲用效果；第二、测定酶活受底物的种类和供应情况影响较大；第三，测定酶活时都是测定单一酶的酶活，不能很好地反映复合酶的组合效应。因此，迫切需要一种更加全面、更加准确、具有实际参考意义的酶制剂饲用活性评估方法。

发明内容

为填补酶制剂的饲用活性评估方面的空白，本发明的一个目的是提供一种酶制剂的饲用活性评估方法，可准确、客观评估酶制剂在畜牧饲料领域作为添加成分的饲用效果。

本发明提供的酶制剂的饲用活性评估方法包括以下步骤：

S1：使用添加有待评估酶制剂的饲料饲喂动物，同时设置不含所述酶制剂的饲料饲喂动物作为对照组；

S2：取饲喂动物粪便，通过16S rDNA测序方法分别得出动物肠道菌群状况；以及

S3：对比对照组，评估动物肠道菌群状况是否具备以下特征：有益菌菌群丰度上调、致病菌菌群丰度下调或消失；如果具有该特征，则判定所述酶制剂具有肠道菌群正向调节的饲用活性，反之，则判定所述酶制剂具有肠道菌群负向调节的饲用活性。

具有肠道菌群正向调节活性的酶制剂添加至饲料后可改善动物肠道菌群结构和机体代谢，从而有利于提高饲喂动物的生长性能，由此可反映出酶制剂具备良好的饲用活性。反之，肠道菌群负向调节的饲用活性由于致病菌的增多而有益菌的减少势必会引起饲喂动物的腹泻等肠道疾病，无法达到改善动物生长性能的目的，由此可说明酶制剂不具备良好的饲用活性，不适合用作饲料添加剂。

本发明所述的评估方法中，所述的有益菌可以包含饲喂动物肠道菌群中的所有有益菌种类，都可作为反映肠道菌群状况的指标。进一步地，可以选用常见的几种肠道有益菌如拟杆菌、梭菌、双歧杆菌、乳杆菌、乳酸杆菌等的丰度来反映肠道菌群状况。

本发明所述的评估方法中，所述的致病菌可以包含饲喂动物肠道菌群中的所有致病菌种类，都可作为反映肠道菌群状况的指标。进一步地，可以选用常见的几种肠道致病菌如肠球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌等的丰度来反映肠道菌群状况。

本发明所述的评估方法中，所述待评估酶制剂可以为单一种类的酶制剂，也可以为多种类的复合酶制剂。

本发明所述的评估方法中，所述步骤S2包括：取饲喂动物的粪便之后，构建所述动物源菌群的小鼠模型或离体恒化器模型，对所述小鼠或所述离体恒化器模型的菌群进行16S rDNA测序从而得出动物肠道菌群状况；或取饲喂动物的粪便之后，直接进行16S rDNA测序从而得出动物肠道菌群状况。

本发明所述的评估方法中，所述步骤S1中的动物的饲喂时间为8～15天。