[发明专利]一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，于玻璃容器中加入硅溶胶HS-40和单氰胺，室温搅拌两个小时使其充分混合均匀，于油浴中搅拌12h，以去除水分；产物研磨后，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在550℃以上高温电阻炉中煅烧3-4h，冷却至室温，研碎至粉末，加入到NH₄HF₂溶液中，过滤，水洗5次，再加入超纯水搅拌，过滤，水洗5次，用乙醇冲洗，冷冻干燥，得黄色产物介孔石墨相氮化碳mpg-C₃N₄；然后与抗肿瘤药物搅拌均匀，超声并旋蒸至去除溶剂，包裹上活化的透明质酸，得基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体；

所述的抗肿瘤药物为血卟啉单甲醚、吲哚菁绿，二氢卟吩，阿霉素，多西紫杉醇等药物中的一种或几种；

所述的NH₄HF₂溶液是NH₄HF₂晶体溶于水中制成，浓度为4mol/L；

所述活化的透明质酸是，取透明质酸20-30mg加入超纯水20-30mL中，搅拌溶解均匀，再加入200-250mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和100-150mg的N-羟基琥珀酰亚胺搅拌20-30min，即成活化的透明质酸。

2.根据权利要求1所述的基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

一、制备介孔石墨相氮化碳，采用硬质模板法制备介孔石墨相氮化碳，方法是：

(1)于玻璃容器中加入16-20g LUDOX HS-40和4-5g单氰胺，加水至100mL，室温搅拌2h，充分混合均匀，成水溶液；

(2)将水溶液置于50-60℃油浴中搅拌12-24h，以去除水分，得干物，干物

(3)将干物研磨成粉，引入硬模板孔道中，置于加盖的坩埚内，在高温电阻炉中以2.5℃/min的速率升温至550℃，保温煅烧3-4h；

(4)冷却至室温，再用研钵研碎至粉末状，加入浓度为4mol/L的氟化氢铵溶液200-250mL中，搅拌2d，去除模板，过滤，用水冲洗5次；

(5)再加入200mL超纯水搅拌1d，过滤，500ml水洗5次；

(6)用乙醇冲洗3次，冷冻干燥，得黄色的介孔石墨相氮化碳；

二、制备透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳，方法是：

于冰浴中向活化的透明质酸溶液中加入浓度3mg/mL的10-15mL介孔石墨相氮化碳溶液，室温反应2-4h；在12000r/min离心15min，去除多余的透明质酸，沉淀物用水复溶，装入MW 8-14KDa的透析袋透析2d，透析液冷冻干燥即得透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳；

三、制备透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚，方法是：

(1) 介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚的制备：

将血卟啉单甲醚与介孔石墨相氮化碳按质量比1-3:1混合在一起，溶解于质量浓度50%的乙醇水溶液中，室温超声2-4h，旋蒸，除去溶剂，得棕红色产物，将产物用水复溶，12000r/min离心5min，除去上层的上清液，得下层的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚；

(2) 制备活化透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚：

于冰浴中向活化的透明质酸溶液中加入制得的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚，室温反应2-4h，然后12000r/min离心15min，沉淀物用水复溶，装入MW 8-14KDa透析袋透析2d；透析液冷冻干燥，即得透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚；

四、制备活化的透明质酸修饰的介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚过氧化氢酶：

将2.50mg 过氧化氢酶溶解于pH7的PBS溶液中，加入介孔石墨相氮化碳载药血卟啉单甲醚2.50mg，超声2-4h，然后旋蒸至溶剂全无，置于活化的透明质酸溶液中，室温反应2-4h，12000r/min离心15min，得沉淀物，沉淀物用水复溶，装入MW 8-14KDa透析袋透析2d，透析液冷冻干燥，得透明质酸包衣的棕红色产物即为基于介孔石墨相氮化碳的抗肿瘤药物载体。