[发明专利]活性人源AGR2的制备方法和试剂盒有效
申请号: | 201710797011.0 | 申请日: | 2017-09-06 |
公开(公告)号: | CN107446942B | 公开(公告)日: | 2021-07-13 |
发明(设计)人: | 李大伟;江文丽;朱奇;赫迪希;武正华 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/12;C07K14/47 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 李艳;许亦琳 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活性 agr2 制备 方法 试剂盒 | ||
1.一种活性人源前梯度蛋白AGR2的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将人源AGR2基因插入载体,所述载体为原核表达载体pMAL-c2,酶切、连接后获得重组表达载体pMAL-AGR2-MBP,并通过突变PCR在所述重组表达载体pMAL-AGR2-MBP中删除MBP基因并插入His标签基因得到AGR2重组表达载体;
(2)将步骤(1)所得AGR2重组表达载体转化宿主细胞,得到转化子;
(3)培养步骤(2)所得转化子并处理培养后的转化子,得到活性人源AGR2;
所述人源AGR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)包括:
通过镍层析柱对所述活性人源AGR2进行纯化。
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