[发明专利]一种基于石墨烯、硫堇和核酸适配体检测甲胎蛋白的方法

权利要求书

1.一种基于石墨烯、硫堇和核酸适配体检测甲胎蛋白的方法，包括以下步骤进行：

步骤1：丝网印刷电极预处理

将丝网印刷电极置于H₂SO₄溶液中进行循环伏安扫描， 活化电极表面后得到活化后的丝网印刷电极，用蒸馏水冲洗干净；

其特征在于，还包括：

步骤2：电极的修饰与生物传感界面的构建

（1）将活化后的丝网印刷电极置入0.01%HAuCl4溶液中，进行电位沉积；所述电位沉积条件为-0.5 V，沉积时间120 s，沉积结束后用蒸馏水冲洗干净；

（2）取制备好的氧化还原石墨烯（RGO）溶液修饰到电极表面，烘干，得到石墨烯修饰电极；滴加硫堇溶液到石墨烯修饰电极上，晾干，得到硫堇/石墨烯修饰电极；

（3）移取甲胎蛋白适配体滴加于硫堇/石墨烯修饰电极表面上，放置于恒温箱中孵育，用PBS缓冲液冲洗掉未能固定到电极上的适配体，滴加BSA溶液封闭电极，置于4℃冰箱中备用，该适配体传感器制备完成；

步骤3：甲胎蛋白AFP标准曲线的绘制

（1）在步骤2得到制备好的适配体传感器，在其上滴加AFP溶液，把电极放置在恒温箱中孵育，反应时间为30-90分钟，用缓冲液将电极表面冲洗干净；

（2）将电极放入PBS溶液中，进行差分脉冲伏安法扫描，记录峰值电流；

（3）根据峰值电流的大小，绘制AFP的标准曲线，计算灵敏度和检测限；

步骤4：待测样品的检测

（1）在步骤2得到的制备好的适配体传感器表面，滴加待测样品， 把电极放置在恒温箱中，反应时间为30-90分钟，用缓冲液将电极表面冲洗干净；

（2）将电极放入PBS溶液中，进行DPV扫描，记录峰值电流；

（3）根据步骤3所述标准曲线，得到所述待测样品溶液中AFP的浓度。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2中的PBS缓冲液的pH 为7.0，浓度为0.1 mol/L。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1中扫描电压为-0.2 V ~ 1.0 V，扫描圈数为10。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3和步骤4中的扫描范围-0.8 V ~0.1 V。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3和步骤4中PBS为pH为6.5，浓度为0.2 mol/L。