[发明专利]从发酵液中分离纯化β-胸苷的方法

权利要求书

1.一种从发酵液中分离纯化β-胸苷的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

a) 将β-胸苷发酵液进行微滤处理，得到微滤液；

b) 将所述微滤液进行超滤处理，得到超滤液；

c) 将所述超滤液依次通过酸性离子交换树脂和碱性离子交换树脂，得到离交液；

d) 将所述离交液用反渗透膜浓缩，得到反渗透浓缩液；

e) 将所述反渗透浓缩液真空浓缩，得到真空浓缩液；

f) 将所述真空浓缩液降温至0-5℃，析晶得到β-胸苷粗品；

g) 将所述β-胸苷粗品在水中用活性炭脱色后重结晶得到β-胸苷精品，

所述方法还包括在微滤处理前将β-胸苷发酵液的pH调节至2.5-4.5的步骤；

所述酸性离子交换树脂选自：D001型强酸性阳离子交换树脂、001X4型强酸性阳离子交换树脂、112型弱酸性阳离子交换树脂；

所述碱性离子交换树脂选自：D201型强碱性阴离子交换树脂、D213型强碱性阴离子交换树脂、313型弱碱性阴离子交换树脂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在微滤处理前，将β-胸苷发酵液的pH调节至3-4。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微滤具有以下一个或多个特征：

(1) 所述微滤采用的滤膜为无机陶瓷膜或聚砜膜；

(2) 所述微滤采用的滤膜的孔径为50-500 nm；

(3) 所述微滤的操作温度为25-100℃；

(4) 所述微滤的操作压力为0.1~0.4 MPa；

(5) 待发酵液为进料发酵液体积的1/3~2/3时，加入进料发酵液体积1.5-5倍的水进行顶洗。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超滤具有以下一个或多个特征：

(1) 所述超滤采用的滤膜为卷式超滤膜，选自聚醚砜膜、聚丙烯腈膜、聚偏二氟乙烯膜；

(2) 所述超滤采用的滤膜的截留分子量为2000Da~12000Da；

(3) 所述超滤的操作压力为0.5~1.5 MPa；

(4) 所述超滤的操作温度为20~40 ℃；

(5) 待微滤液为进料微滤液体积的1/20~1/60时，加入进料发酵液体积1/12~1/4的水进行顶洗。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，D001型强酸性阳离子交换树脂、001X4型强酸性阳离子交换树脂、D201型强碱性阴离子交换树脂、D213型强碱性阴离子交换树脂的用量为进料发酵液体积的25%~40%。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，112型弱酸性阳离子交换树脂、313型弱碱性阴离子交换树脂的用量为进料发酵液体积的45~55%。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反渗透具有以下一个或多个特征：

(1) 所述反渗透采用的滤膜选自醋酸纤维素膜、聚酰胺膜；

(2) 所述反渗透的操作压力为0.5~2.5 MPa；

(3) 所述反渗透的操作温度为20~40 ℃；

(4) 经反渗透离交液浓缩至原体积的1/4~1/12，得到反渗透浓缩液。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤e)，真空浓缩在40-50℃下进行，得到的真空浓缩液中β-胸苷含量达到150-300 g/L。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤g)包括以下步骤：

g1) 将β-胸苷粗品悬浮于3~5.5倍重量的水中，加热至45-90℃，使固体溶解；

g2) 加入活性炭，搅拌15~60分钟脱色；

g3) 趁热过滤，滤液冷却至0-5℃，析晶得到β-胸苷精品。