[发明专利]一种山里红叶中活性成分的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种山里红叶中活性成分的提取方法，具体涉及使用负压空化提取法获得山里红叶中酚类化合物，属于药用植物开发领域。

背景技术

山里红(蔷薇科)因其有益于健康且低毒性而频繁的应用于食品工业中，主产于中国东北。最近的研究表明，山里红叶具有多种生物活性，如抗氧化活性、抗炎活性、增强血管弹性和降血脂作用。山里红叶中分离出多种活性物质，如多酚、三萜、花青素和有机酸等。其中，酚类物质包括绿原酸(CA)，牡荆素-4″-O-葡萄糖苷(VG)，牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(VR)，荭草苷(ORT)，芦丁(RT)，牡荆素(VIT)和金丝桃苷(HYP)，它们常被用于治疗心脑血管疾病、高血压、抗氧化和高血脂等。因此，需要为制药和健康食品行业开发一种有效可靠的提取方法提取山里红叶中促进健康的酚类化合物。在之前的研究中，已利用几种方法如 HPLC-UV和HPLC-MS/MS来分析山里红叶中的酚类化合物。从传统植物材料中提取活性化合物的方法如浸渍提取和热回流提取，随着提取时间延长都要消耗大量有机溶剂和能量。

负压空化法提取效率高、设备简单并且易于操作，适用于工业化生产。本发明中，负压空化法同时提取山里红叶中7种酚类化合物包括CA、VG、VR、ORT、RT、VIT和HYP。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以山里红干燥叶为原料，应用负压空化提取技术获得山里红叶中七种酚类化合物的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：山里红干燥叶经过3-7天自然风干或在30- 50℃下烘干24-36h，经粉碎后可通过60目筛网。将1kg山里红干燥叶粉末与体积浓度为 50-90％的乙醇溶液以料液比1:15-1:30混合后进行负压空化提取。负压提取压力为-0.03-- 0.07MPa，提取次数2-4次，提取时间20-50min。提取完成后通过离心或过滤等分离手段得到提取液。合并提取液，减压浓缩至干，即得到山里红叶提取物。通过高效液相色谱法检测山里红叶提取物，得到七种酚类化合物。

本发明的优点：

(1)本发明所利用的山里红叶及提取物是一种潜在的促进健康的抗氧化剂，可在药品和食品行业中充当添加剂；

(2)本发明使用的负压空化法设备简单，易于操作，提取率高，比传统的浸渍提取法和热回流提取法获得的提取物表现出更好的抗氧化活性；

(3)本发明的HPLC检测方法可作为山里红叶原料和产品检测方法。

附图说明

附图1绿原酸(CA)，牡荆素-4″-O-葡萄糖苷(VG)，牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(VR)，荭草苷 (ORT)，芦丁(RT)，牡荆素(VIT)和金丝桃苷(HYP)结构图

附图2七种酚类化合物标准品溶液和山里红干燥叶样品溶液的高效液相色谱图(HPLC检测条件如下，色谱条件为：色谱柱为HiQ sil C₁₈柱(5μm，250mm×4.6mm)，流动相为四氢呋喃:乙腈:水:磷酸＝175:31:794:0.325，流速为1.0mL/min，检测波长350nm，柱温 30℃，进样量为10μL)

附图3山里红叶提取物DPPH自由基清除率

具体实施方案

实施例1：

将1kg山里红干燥叶粉末加入70％的乙醇溶液以料液比1:20混合后进行负压空化提取。负压提取压力为-0.05MPa，提取次数2次，提取时间40min，提取完成离心得到提取液。合并后减压浓缩至干，即得到山里红叶提取物。使用Waters1525高效液相色谱分析仪，2996 紫外检测器检测山里红叶提取物，HPLC检测条件如下，色谱条件为：色谱柱为HiQ sil C₁₈柱(5μm，250mm×4.6mm)，流动相为四氢呋喃:乙腈:水:磷酸＝175:31:794:0.325，流速为1.0mL/min，检测波长350nm，柱温30℃，进样量为10μL，得到七种酚类化合物。