[发明专利]一种海洋真菌来源的Lasiodiplodins化合物的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物化合物的技术领域，更具体地，涉及一种海洋真菌来源的Lasiodiplodins化合物的制备方法及应用。

背景技术

Lasiodiplodins化合物的结构式如式（Ӏ）所示：

（Ӏ）

现有技术中Lasiodiplodins化合物的有机合成方法复杂、合成成本比较高，限制了人们对Lasiodiplodins化合物的深入研究和应用开发。因此，关于Lasiodiplodins化合物的功能方面的研究鲜有报道。

海洋真菌来源广泛，药物筛选获得率高，与其它海洋生物相比，最大的优势就是对环境友好，具有可持续性发展的特征。海洋真菌在特殊环境之中，已发展出独特的代谢方式，能够产生结构新颖、生理活性显著的各类次级代谢产物。其代谢产物具有抗菌、抗肿瘤、免疫调节、酶抑制等多种药用价值。目前，从包括海洋真菌在内的海洋微生物中寻找新的药源已成为国际国内研究的热点。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术所述的缺陷，提供一种Lasiodiplodins化合物的制备方法，具体为从海洋真菌Lasiodiplodia sp. 307的发酵产物中分离得到所述化合物。另外，发明人通过研究发现，所述Lasiodiplodins化合物对金黄色葡萄球菌均表现表现较好的抗菌活性，可应用于制备抗菌药物。

因此，本发明的另一个目的是提供上述Lasiodiplodins化合物的应用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

一种Lasiodiplodins化合物的制备方法，包括以下步骤：

S1. 将海洋真菌Lasiodiplodia sp. 307菌株接入种子培养基，摇床培养，得到种子培养液；

S2. 将种子培养液接入发酵培养基中，静置培养得到发酵物；

S3. 将发酵物用甲醇浸泡提取，甲醇提取液浓缩后经氯仿萃取、浓缩，得到浸膏，再经层析分离，得到式（Ӏ）化合物；

所述海洋真菌Lasiodiplodia sp. 307菌株已在广东省微生物菌种保藏中心保藏，保藏地址是中国广州市先烈中路100号省微生物所实验楼五楼，保藏日期是2017年08月01日，保藏号是GDMCC No: 60216；

其中，所述Lasiodiplodins化合物的结构式如式（Ӏ）所示：

（Ӏ）。

本发明所述海洋真菌Lasiodiplodia sp. 307菌株的来源为采自广东省湛江红树林自然保护区苦郎树（Clerodendrum inerme）的茎，所述海洋真菌的分类命名是：Lasiodiplodia sp.。

进一步地，步骤S1中，所述种子培养基为马铃薯葡萄糖水培养基。优选地，所述马铃薯葡萄糖水培养基的组分为：葡萄糖18~22 g、马铃薯290~310 g（从中提取浸出粉）、水0.95~1.05 L。

更优选为，葡萄糖20 g、马铃薯300 g（从中提取浸出粉）、水1 L。

进一步地，步骤S1中，所述摇床培养的条件是：25~28℃下，摇床转速150~200 rpm，培养时间为25~35天。优选为28℃下，摇床转速150 rpm，培养时间为4天。

进一步地，步骤S2中，所述发酵培养基为大米培养基。优选地，所述大米培养基的组分为：大米45~55 g、水80~110 mL。更优选为：大米50 g、水100 mL。

进一步地，步骤S2中，所述静置培养的条件是：25~28 ℃下，培养时间为25~35天。优选为：28℃下，培养时间为28天。

进一步地，步骤S3中，所述甲醇的用量为与发酵物等体积；氯仿用量为甲醇用量的1/3；所述浸膏用硅胶柱进行层析分离，硅胶柱进行层析分离时分别用10:0、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5、4:6、3:7、2:8、1:9和0:10的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱。

更进一步地，还将8:2的石油醚-乙酸乙酯洗脱部分用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20层析，用体积比为1:1的二氯甲烷-甲醇为洗脱剂进行洗脱。

所述硅胶柱为本领域所用到的常规硅胶柱，硅胶柱的目数为100~200目。

上述制备方法所获得的Lasiodiplodins化合物具有抗菌活性，可用于制备抗菌药物。

所述抗菌为抗金黄色葡萄球菌。