[发明专利]短肽ATR001以及由短肽制备具有偏向性调节AT1R功能的单克隆抗体和应用

说明书

本发明公开了一种短肽ATR001以及由短肽制备具有偏向性调节AT1R功能的单克隆抗体和应用，该短肽ATR001，其氨基酸序列为AFHYESQ，杂交瘤细胞CQ8‑A2D9，其保藏编号为：CCTCC NO：C2017108。本发明运用单克隆抗体技术制备针对AT1R单克隆抗体，且该抗体可以偏向性调节AT1R功能，在血管重构类疾病，如高血压、动脉粥样硬化、动脉瘤中发挥治疗作用。

技术领域

本发明涉及短肽和单克隆抗体，具体地指一种短肽ATR001以及由短肽制备具有偏向性调节AT1R功能的单克隆抗体和应用。

背景技术

肾素-血管紧张素系统(RAS)是调控人体生理功能的重要系统。肾素是由肾脏球旁细胞产生和分泌的一种蛋白水解酶，可水解血管张素原(AGT)生成血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)。心脏、血管、肾、肺等组织中广泛分布的血管紧张素转化酶(ACE)，可将AngⅠ降解为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)，此外，AngⅠ也可在组织蛋白酶、弹性蛋白酶、糜酶(chymase)等作用下生成AngⅡ，或由内肽酶直接降解为血管紧张素1-7(Ang1-7)等一些列小分子活性物质。同时血管紧张素转化酶2(ACE2)也可作用于AngⅡ生成血管紧张素1-7(Ang1-7)等活性小分子。

目前研究表明，RAS通过两种方式发挥作用：一种是肾球旁细胞分泌的肾素及肝脏释放的AGT进入血液循环，通过一系列酶的水解作用生成活性小分子片段发挥生理作用。另一种是以旁分泌方式在局部生成AngII等活性分子发挥作用。目前认为，AngⅡ是RAS中最主要的生物活性肽，与相应受体结合发挥生物学效应，其中AT1受体(AT1R)是最关键的一种AngⅡ受体。作为一种G蛋白耦联受体(GPCR)，AT1R有典型的七次跨膜α螺旋结构，主要分布在血管、心脏、肾脏、脂肪等组织和器官。AngⅡ和AT1R结合后发挥以下作用：

1、缩血管，升血压；

2、促进细胞增生和肥大；

3、促进间质纤维化；

4、参与细胞凋亡；

5、调节细胞代谢；

6、促凝血作用；

7、促进醛固酮生成；

8、作用于中枢神经系统，调节水盐代谢，影响交感神经张力。

AT1R在人体血压调节中起重要作用，对高血压疾病的发生发展发挥着举足轻重的作用。有研究表明AngⅡ和AT1R作用，可激活血管内皮细胞膜上的NADH/NADPH氧化酶，诱导产生超氧阴离子(O^2-)，O^2-一方面可直接收缩血管，另一方面可与NO相互作用，抑制NO的舒血管作用，并可促进H₂O₂、NO₂、PGF2等缩血管物质的产生。此外，AngⅡ还可刺激内皮素的释放，最终导致血管平滑肌增殖和收缩、内皮损伤、血管壁重构而引起高血压病的发生和发展。

AT1R也参与了动脉粥样硬化的发生与发展过程。研究发现，相比Ldlr^-/-小鼠，AT1R与Ldlr基因双敲的小鼠能明显减轻高胆固醇血症诱导的动脉粥样硬化程度。Wassmann等还研究证实apoE与AT1R基因双敲小鼠能有效阻断高胆固醇饮食所致的血管的氧化应激、内皮功能失调、动脉粥样硬化病变形成，且独立于血压和血脂水平。进一步研究表明，AngⅡ通过AT1R激活血管内皮细胞细胞膜上的NADP/NADPH氧化酶，产生的O^2-，进而活化NFκB，启动MCP-1表达，促使血中单核/巨噬细胞向血管壁聚集并迁移至内皮下，随后向炎症表型变化，参与泡沫细胞的形成等动脉粥样硬化早期病变。