[发明专利]一套同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症、肝豆状核变性病的引物组及方法

说明书

本发明公开了一套可以同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症和肝豆状核变性病相关基因突变的引物组及其检测方法。所述引物组由包括9对引物的引物池1、包括10对引物的引物池2和包括8对引物的引物池3组成，上下游引物序列依次如SEQ ID NO.1～54所示。该引物组的三个引物池可同时进行多重PCR扩增，结合高通量测序技术，建立了一种可以同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症、肝豆状核变性病四种遗传病常见的致病突变位点，且该方法高效、快速、准确、重复性好，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于疾病检测技术领域。更具体地，涉及一套同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症、肝豆状核变性病相关基因的引物组及检测方法。

背景技术

地中海贫血(简称“地贫”)是全球最常见、对人类健康影响最大的单基因遗传病，也是世界卫生组织(WHO)推荐进行重点预防的遗传病。临床上，以α-地贫和β-地贫最多见，其发病相关基因分别为HBA2和HBB。耳聋是影响人类健康和致残的常见病，也是最常见的遗传性疾病，据统计，新生儿中耳聋的发病率为1‰，影响它的基因主要有GJB2、GJB3和SLC26A4等；耳聋基因诊断结果对耳聋的预防、辅助诊断、康复治疗有很好的指导意义。

苯丙酮尿症是由于肝脏苯丙氨酸羟化酶缺乏所致的一种严重的遗传性氨基酸代谢障碍性疾病，由苯丙氨酸羟化酶基因突变导致肝脏苯丙氨酸羟化酶缺乏所致的苯丙酮尿症占97％～99％；未经治疗的患者，会出现脑组织损伤和不可逆的智力发育障碍，重症患儿可于3岁内死亡；发病率为1/16500，携带者率为1/50～1/60；苯丙酮尿症是可治性的遗传病之一，早期基因诊断可以尽早发现患者，应用饮食疗法可以减轻或者控制患者症状；因此及早准确地诊断PKU有十分重要的意义。

肝豆状核变性病是一种常染色体隐性遗传铜代谢障碍疾病，基因突变可引起铜蓝蛋白合成障碍、胆汁中铜排泄受阻，过量的铜不能排出体外而在体内沉积，导致肝硬化、神经症状、角膜环、尿铜升高等临床表现。在我国患病率约为1/10万，人群杂合子携带率为1/4000，目前已明确主要与ATP7B基因突变密切相关。是通过早期诊断可以治疗的遗传代谢病之一。目前治疗的药物主要是应用铜离子螯合剂青霉胺和离子交换剂硫酸锌，其预后与诊断治疗早晚关系密切，如能早期诊治，尤其是在症状前期开始治疗，则绝大多数预后良好；若治疗较晚，肝、脑及肾等重要器官已发生了不可逆性损害，最多只能获得部分症状的改善，其预后不佳。因此，症状前和早期诊断非常重要，而在症状前的生化检测指标仅依靠血清铜蓝蛋白是不够的，如能发现ATP7B基因突变类型，就能及早采取减少铜摄入和促进铜排出的治疗，保证机体器官的正常功能。

综上所述，地贫、耳聋、苯丙酮尿症和肝豆状核变性病是几种常见的遗传病，在人群中发病率高，危害大。进行基因检测能够在医学上实现尽早干预，达到及早发现，及早治疗的效果。

发明内容

本发明提供了一种可以同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症、肝豆状核变性病四种遗传病相关基因的方法，应用多重PCR扩增技术结合高通量测序技术，通过文库构建、上机测序、分析测序数据，可以准确快速地同时检测出地贫、耳聋、苯丙酮尿症和肝豆状核变性病多个致病基因的突变型别，可以同时检测四种遗传疾病的常见的致病突变位点，实现四种疾病的同时检测。

本发明的目的是提供一套可以同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症和肝豆状核变性病相关基因的引物组。

本发明另一目的是提供一种可以同时检测地贫、耳聋、苯丙酮尿症和肝豆状核变性病相关基因的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：