[发明专利]一种检测孔雀石绿的SiO2@ROX纳米粒子荧光探针阵列的制备方法

说明书

一种检测孔雀石绿的SiO₂@ROX纳米粒子荧光探针阵列的制备方法，包括用APTS与有机染料ROX进行偶联，在碱性条件下与TEOS水解合成表面功能化修饰氨丙基的SiO₂@ROX纳米粒子，在刻蚀的硅片上制备出SiO₂@ROX纳米粒子荧光探针阵列。本发明的制备过程包括如下三个步骤：首先是在乙醇体系中制备ROX‑APTS前驱体，然后，运用溶胶‑凝胶法将氨丙基和ROX染料功能化修饰到SiO₂纳米粒子表面，最后，将SiO₂@ROX纳米粒子荧光探针滴加到在刻蚀微洞的硅片上，抹去表面多余的粒子，制备出比表面积大、识别位点多、敏感性强的SiO₂@ROX纳米粒子荧光探针阵列选择性识别和痕量检测目标分析物孔雀石绿。

技术领域

本发明涉及材料科学领域，特别涉及具有对痕量孔雀石绿检测的SiO₂@ROX纳米粒子荧光探针阵列的制备方法。。

背景技术

孔雀石绿（malachite green，MG）在生物体内快速代谢产生脂溶性隐色孔雀石绿，具有难分解、高毒性、高残留、高致癌、高致畸和致突变等危害，目前已被许多国家列为水产养殖禁用药。因此，对超痕量三苯甲烷类化合物的检测和相关荧光探针阵列的研究已经引起了社会研究机构广泛的关注和富有成效的探索。孔雀石绿等三苯甲烷物质的实验室检测已经通过酶联免疫法、液相色谱法、高效液相色谱法、薄层层析法等被广泛的应用。这些传统分析技术能够满足选择性、可靠性、准确性和可重复性等分析中的基本要求，但其成本高昂、耗时长、步骤繁琐，且检测样品必须脱离检测现场送往实验室分析，不能够实时实地进行检测。综上所述，有必要寻求一种能够快速便捷检测孔雀石绿的方法。因此，为了解决孔雀石绿的检测问题，迫切需要一种能够对环境中孔雀石绿目标分析物提供高选择性、高灵敏、快速响应、低成本和原位检测的荧光探针。

近年来，对孔雀石绿类化合物检测的方法层出不穷，例如吴青科研小组（CN201310350236.3）提供了一种孔雀石绿ELISA检测试剂盒以及孔雀石绿的检测方法。该检测试剂盒包括：SPG蛋白、包被缓冲液、封闭液、孔雀石绿抗体、偶联有HRP的孔雀石绿、显色剂和终止剂。该检测方法包括：将SPG蛋白与包被缓冲液混合并在固相载体上孵育；向该固相载体上加入封闭液并孵育；向该固相载体上加入孔雀石绿抗体并孵育；向该固相载体上加入待测样品，同时加入偶联有HRP的孔雀石绿；向该固相载体上先后加入显色剂和终止剂。该试剂盒成本低、灵敏度高以及样品通量较高，因此，可用作食品及环境中孔雀石绿的监测，尤其适合于现场监控及大样品检测。

这类酶联免疫检测法有许多优点，但是也存在不足之处。检测过程中出现的颜色反应需要依靠人眼判断，存在主观性且存在假阳性问题，易使结果产生误差。

上海海洋大学黄轶群科研小组（CN201210179713）也公开的一种孔雀石绿的检测方法，其特征是将孔雀石绿标准溶液滴加到纳米金颗粒修饰的具有表面活性的拉曼基底上，待溶剂蒸干后，使用激光波长为633nm的共聚焦显微拉曼光谱仪采集孔雀石绿表面增强拉曼光谱，该孔雀石绿表面增强拉曼光谱具有1610，1360，1170，798，913，432cm^-1处特征峰。该检测方法的应用，是用以检测水体中的孔雀石绿或隐性孔雀石绿残留量，其结合纳米金颗粒修饰的SERS活性基底和SERS技术，可应用于检测水产品的渔药残留孔雀石绿和隐性孔雀石绿中。但该法成本较高，无法广泛使用，不能实时实地进行检测。