[发明专利]一种利用干细胞提取物和中药提取物混合制备的银屑病皮肤修复剂有效
申请号: | 201710812387.4 | 申请日: | 2017-09-11 |
公开(公告)号: | CN107551095B | 公开(公告)日: | 2020-12-25 |
发明(设计)人: | 童强;汪佳祺 | 申请(专利权)人: | 上海亚睿生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K36/888 | 分类号: | A61K36/888;A61P17/06;A61P17/02;A61K35/28 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 周春洪 |
地址: | 200090 上海市杨浦区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 干细胞 提取物 中药 混合 制备 银屑病 皮肤 修复 | ||
1.一种利用干细胞提取物和中药提取物混合制备的皮肤修复剂在制备加快创口愈合并减少创口愈合时疤痕形成的药物中的应用,所述皮肤修复剂制备方法如下:
(1)干细胞提取物的制备:将华通氏块碎块用含胶原酶II的DMEM培养基消化,过滤后使用含10%胎牛血清FBS的DMEM培养基传代培养,再换用无血清DMEM培养基传代培养,2天传代一次,收集传代3-5代的细胞进行后续处理;用含EDTA的DMEM培养基消化细胞,并用PBS溶液清洗,再用无血清DMEM培养基重悬,超声波裂解破碎细胞,破碎产物离心后取上清;将上清用孔径为5000埃的滤器过滤;
(2)中药提取物的制备:按重量份取充分干燥的中药原料:木槿花4-10份、甘草2-5份、荷叶10-15份、石菖蒲5-10份,粉碎后过40目筛,加入体积分数70-80%的乙醇配成料液比为1:20~40g/mL的溶液,选择提取温度30-40℃、提取时间20-30min、超声波功率120-240W进行提取,提取液于6000r/min下离心20min,取上清液,用乙醇定容;用和定容液等体积的水饱和正丁醇进行萃取,共萃取4-6次;将回收的正丁醇溶液用负压离心机抽干,残留物用无水乙醇溶解;其总黄酮含量不小于20mg/L;
(3)皮肤修复剂的制备:将干细胞提取物和中药提取物混合。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤(1)中所述的超声波裂解破碎细胞,其具体参数是100-150W,10-20S*15-25次,10-20S间隔。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤(1)中所述的EDTA浓度为0.04-0.06M。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤(1)中所述的用孔径为5000埃的滤器过滤,具体是使用超滤管超滤提纯和浓缩,时间为25-40min,压力为0.25-0.35MPa。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,步骤(2)中的中药原料为木槿花7份、甘草3份、荷叶12份、石菖蒲8份。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的中药提取物和干细胞提取物的体积比为1:12-30。
7.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述皮肤修复剂以单独使用或者以药物组合物的形式使用,所述药物组合物包含有效量的权利要求1-6任一所述皮肤修复剂,以及至少一种药学上的载体。
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