[发明专利]一种从大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的方法在审
| 申请号： | 201710817893.2 | 申请日： | 2017-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN107418953A | 公开（公告）日： | 2017-12-01 |
| 发明（设计）人： | 高世斌;任志勇;丁鑫;刘丹;吴玲;苏顺宗;聂治;罗博文;马鹏;陈圳;冯幸;刘坚;唐祈林;瞿华兴;王怡凯;沈亚欧 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大刍草里 扩增 玉米 信号 响应 基因 方法 | ||
1.一种大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的引物组，其特征在于，包括以下五个引物对，具体为：
1-F:5'-TGCCTGAATAAAGATAAGTATG-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
1-R:5'-AGCAGTACAGTATCCAACAAG-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；
2-1F:5'-ATCGCCGGGAGCATCTCAAAC-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
2-1R:5'-TGCAGGTCCAGACCAGCAACG-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
2-2F:5'-TGCTGCTTGACTAGCTTTCTGA-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；
2-2R:5'-TTCCTTCCTTTCCCTTCCCTC-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；
3-1F:5'-TGGAGCGATTTGTGGACCTGG-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；
3-1R:5'-AGCTCACGGACTTGGCGGTTT-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；
3-2F:5'-AGGGAAGGGAAAGGAAGGAAG-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；
3-2R:5'-ATCACATCTCGCACAGGCATC-3'；其核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。
2.一种从大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：在大刍草里提取待测玉米磷信号响应基因总DNA，分别利用权利要求1所述5个引物对进行PCR扩增反应，分别进行克隆测序，最后拼接序列，得到玉米磷信号响应基因全基因组序列。
3.根据权利要求2所述的从大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的方法，其特征在于，所述引物对1、2-1、2-2、3-1、3-2的退火温度分别为52.00℃、63.30℃、60.00℃、63.90℃和60.20℃。
4.根据权利要求3所述的从大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应的程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，退火温度下退火15s，72℃延伸45min，循环35次；72℃终延伸5min；所述退火温度对应为5个引物对各自对应的退火温度。
5.根据权利要求3所述的从大刍草里扩增玉米磷信号响应基因的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应的体系为：Phanta Max B uffer 12.5μL、基因组DNA 2.0μL、dNTP Mix 0.5μL、上游引物1.0μL、下游引物1.0μL、1U/μL Phanta Max Super-Fidelity DNA Pol ymerase0.5μL、ddH2O7.5μL。
6.权利要求1所述引物组在玉米磷信号响应基因或基因组扩增方面的应用。
7.权利要求2-5中任一权利要求所述方法在玉米磷信号响应基因或基因组扩增方面的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于四川农业大学，未经四川农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201710817893.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
